RNA viru hepatitidy C: Co to je, detekční testy, Norm

Hepatitida C (HCV) je virová infekce, která postihuje játra. Často se rychle stane chronickým, aniž by se jakkoli projevil (má latentní průběh), ale způsobil narušení imunitního systému těla. V 5 případech ze 100 je onemocnění charakterizováno přítomností žloutenky, v 95 % se vyskytuje v anikterické formě.

Virus hepatitidy C patří do tzv. čeledi. flaviviry a je vysoce odolný vůči vlivům prostředí. Proteiny, které ji tvoří (jsou jen tři), působí jako antigeny s podobnými vlastnostmi.

K dnešnímu dni bylo identifikováno 6 podtypů viru. Toto množství genetických variant ji činí „nepolapitelnou“ pro imunitní systém těla, což vytváří problémy při vývoji vakcíny a stanovení diagnózy v laboratorních podmínkách (pokud protilátky během infekce chybí nebo nejsou detekovány z důvodu extrémně malého množství, tzv. – tzv. séronegativní forma hepatitidy C). Tato variabilita viru je také důvodem, proč může být onemocnění zpočátku chronické.

Infekce hepatitidou C se vyskytuje:

• parenterálně (s intravenózními injekcemi, transfuzí krve nebo jejích složek, použitím umělé ledviny, transplantací orgánů);
• pohlavně přenosné choroby (obzvláště ohroženi infekcí jsou lidé, kteří jsou promiskuitní nebo mají nechráněný sex);
• transplacentární cestou (od infikované matky k nenarozenému dítěti).

V naprosté většině případů dochází k infekci krví extrémně vzácně. Virus hepatitidy C představuje zvláštní nebezpečí pro injekčně narkomany, zdravotnické pracovníky, pacienty se selháním ledvin a osoby vyžadující krevní transfuze; často se měnící sexuální partneři, kteří jsou v místech zbavení svobody.

Virus při vstupu do těla proniká do krevních makrofágů (buňky zachycující cizorodé a škodlivé látky) a buněčných struktur jater a zahajuje v nich proces klonování (samoreprodukce). To vede k destrukci jaterních buněk. Kromě toho jsou zničeny buňky odpovědné za imunitní odpověď, což je způsobeno podobností virových antigenů a histokompatibilních antigenů (systém kompatibility lidské tkáně).

Systémové projevy působení viru mohou být vyjádřeny výskytem následujících autoimunitních stavů (vyznačují se tím, že imunitní systém těla začíná bojovat sám se sebou):

• autoimunitní tyreoiditida (zánět štítné žlázy);
• Sjogrenův syndrom (progresivní autoimunitní onemocnění pojivové tkáně a žláz zevní sekrece, zejména slzných a slinných žláz);
• idiopatická trombocytopenická purpura (snížení hladiny krevních destiček v krvi, což zvyšuje krvácení a snižuje srážlivost);
• glomerulonefritida (poškození glomerulů ledvin);
• revmatoidní artritida atd.

Na rozdíl od jiných typů hepatitid má hepatitida C častěji než ostatní chronickou formu a je méně klinicky manifestována. Statistiky ukazují, že u 20–50 ze 100 lidí, kteří onemocní, se jako komplikace infekce rozvine cirhóza a u 1,25–2,5 % se vyvine rakovina jater.

Inkubační doba infekce trvá od 5 do 20 dnů. Jeho konec je charakterizován zvýšením koncentrace enzymů produkovaných játry (transamináz) v krvi, ke kterému dochází v důsledku destrukce jaterních buněk. Akutní období je charakterizováno slabostí a ztrátou chuti k jídlu. Ve třetině případů je onemocnění doprovázeno horečkou, artralgií (bolesti kloubů), polymorfní vyrážkou (vyrážka skládající se z různých prvků – papuly, krvácení, vezikuly, buly atd.). Někdy pacienti pociťují bolest v horní části břicha a polyneuropatii (poškození periferních nervů, způsobující sníženou citlivost, ochablou paralýzu atd.). Pouze 5 % pacientů pociťuje kongesci ve žlučových cestách. V důsledku laboratorních testů je zjištěna přítomnost cytolýzy (úplné nebo částečné rozpuštění buněk pod vlivem protilátek). Hladina jaterních transamináz, pětkrát vyšší než normálně, a přítomnost známek selhání jaterních buněk dávají důvod předpokládat, že tělo je současně postiženo dvěma viry hepatitidy – C a B.

Tento test detekuje RNA viru hepatitidy C (HCV) v krevním séru pacienta. Testování se provádí metodou polymerázové řetězové reakce (PCR) k detekci specifických fragmentů RNA viru hepatitidy C v reálném čase. Podstatou molekulárně biologické metody PCR je výrazně zvýšit nízké koncentrace úseků virové RNA a sledovat je v reálném čase.

• předmět studia: specifická oblast RNA viru hepatitidy C;
• lineární rozsah (rozsah hodnot, ve kterém lze přesně určit počet kopií specifických fragmentů RNA infekčního agens): 250 – 250 000 000 kopií/ml;
• specifičnost testu: 100 %.

Studium množství specifických fragmentů RNA hepatitidy C v krevní plazmě slouží ke stanovení účinnosti léčby a pravděpodobnosti přechodu onemocnění do chronicity. V případě, že je hladina viru nižší než 800 000 IU/ml, je léčebná taktika účinná a má pozitivní trendy. Pokud je hladina viru vyšší než specifikovaná hodnota, pak je třeba upravit léčbu. Počet fragmentů virové RNA pod 80 000 IU/ml při současné detekci jejího genotypu poskytuje maximum informací pro stanovení očekávaného stupně účinnosti terapie. Indikátorem účinnosti léčby je snížení hladiny specifických fragmentů virové RNA o 85 % do 3 dnů od zahájení léčby.

Na přípravu nejsou kladeny žádné zvláštní požadavky. Krev se doporučuje darovat ráno nalačno. Před testováním není vhodné pít džusy, čaj nebo kávu.

• Před vyšetřením je nutné vyloučit psycho-emocionální a fyzický stres (včetně návštěvy bazénů, tělocvičen, saun atd.);
• 24 hodin před odběrem krve je zakázána konzumace alkoholických nápojů (včetně piva);
• Hodinu před vyšetřením je zakázáno kouřit;
• Před darováním krve se musíte poradit se svým lékařem o možném vlivu léků, které užíváte na výsledky testu;
• v den darování krve, přísně po dohodě s ošetřujícím lékařem, přestat užívat ty léky, které mohou zkreslit výsledky, a pokud nelze přestat, upozornit na to pracovníky laboratoře;
• Bezprostředně před odběrem vzorku je vhodné strávit 10-15 minut v klidném stavu.

Varování! Krev na analýzu se neodebírá po intramuskulárních a intravenózních injekcích, fyzioterapeutických procedurách, masážích, krevní transfuzi, fluorografii, kolposkopii, gastroskopii, biopsii, punkci, rentgenovém, manuálním, přístrojovém, rektálním, ultrazvukovém vyšetření, elektrokardiogramu, jiném terapeutickém a/nebo diagnostické manipulace.

Důležité! Při provádění dynamických studií se doporučuje, aby byl biomateriál předán do stejné laboratoře, nejlépe ve stejnou denní dobu, maximálně s dodržením podmínek pro přípravu na testování (strava, fyzická aktivita atd.)

• pokud je kvalitativní test na přítomnost RNA viru hepatitidy C v krvi pozitivní;
• vypracovat plán léčby;
• pro přesné posouzení účinnosti léčby.

Pozornost. Tento test se nepoužívá jako primární test na přítomnost viru hepatitidy C v krvi a jeho produktech ani k diagnostice infekce HCV.

Množství specifických fragmentů RNA viru hepatitidy C se měří v kopiích na mililitr biomateriálu (kopie/ml).

Alternativní jednotky měření jsou mezinárodní jednotky na mililitr (IU/ml).

Jednotky jsou převedeny podle vzorce: 1 ME = 2,5 kopie.

Lineární rozsah koncentrací: od 250 do 250 milionů kopií/ml (100-10^8 IU/ml).

Absence specifických fragmentů RNA viru hepatitidy C ve studovaném vzorku biomateriálu je považována za normální.

Výsledek je interpretován následovně:

• nezjištěno – v nepřítomnosti fragmentů RNA viru hepatitidy C;
• zjištěno – odpověď je pozitivní, koncentrace specifických fragmentů virové RNA je pod 250 kopií/ml (pod 100 IU/ml); počet kopií virové RNA v tomto rozsahu hodnot není specifikován;
• detekováno – odpověď je kladná, pokud je počet detekovaných fragmentů RNA větší než 250 kopií/ml (> 100 IU/ml); Když je získán tento výsledek, je uveden přesný počet kopií specifických fragmentů virové RNA v lineárním rozsahu.

Je-li nutné provést potvrzující studie, může být doba analýzy prodloužena.

Výsledek testu je vydán na formuláři laboratoře lékařské společnosti „Nauka“. Příklad této analýzy je uveden níže:

CELÉ JMÉNO.: Ivanov Ivan Ivanovič Pohlaví: м Rok narození: xx.xx.xxxx

Datum výzkumu: xx.xx.xxxx

Výzkum

Výsledek

Normy interpretace

Poznámka