Mycobacterium tuberculosis, charakteristika, diagnostika

Laboratorní diagnostika tuberkulózy, bez ohledu na lokalizaci procesu, se provádí podle jediného algoritmu.

Pro laboratorní diagnostiku tuberkulózy se používá jakýkoli materiál dostupný k vyšetření v souladu s lokalizací procesu: sputum, bronchoalveolární laváž, vyšetření pleurální, synoviální, ascitické tekutiny. U pacientů s podezřením na VLT je s vhodnou lokalizací možné vyšetřit i močový sediment, ejakulát, sekreci prostaty, menstruační krev, výtok z ucha, výtok z píštělí, punkce, biopsie, likvor atd.

— Doporučuje se provést alespoň dvě studie sputa v intervalu 2–3 dnů nebo jiný diagnostický materiál (molekulárně biologická studie sputa, bronchoalveolární tekutiny, bronchiálních výplachů, pleurální tekutiny, nativní preparace tracheální a bronchiální tkáně nebo parafínového bloku , další diagnostický materiál o komplexu Mycobacterium tuberculosis pomocí kombinace mikrobiologických a molekulárně genetických metod u pacientů s podezřením na tuberkulózu k detekci MBT [19].

Síla doporučení C (úroveň důkazu 1)

Komentář: Rychlá a kvalitní etiologická diagnostika tuberkulózy je základem diagnostických opatření pro tuberkulózu dýchacích orgánů. Prioritou je potvrdit/vyloučit přítomnost komplexu mycobacterium tuberculosis (MTC) v diagnostickém materiálu metodami s nejvyšší dostupnou senzitivitou a specificitou. Aby se minimalizovala pravděpodobnost nesrovnalostí ve výsledcích získaných různými metodami, měla by být provedena komplexní studie z jediného vzorku diagnostického materiálu.

— Pacientům s předpokládanou diagnózou plicní tuberkulózy se doporučuje zařadit do komplexu laboratorních testů k průkazu MBT mikroskopické vyšetření sputa nebo jiného diagnostického materiálu na mykobakterie — minimálně dva vzorky. Pro sledování efektivity léčby se během intenzivní fáze provádí jedna studie měsíčně a v pokračovací fázi alespoň jednou za dva měsíce [20–22].

Síla doporučení C (úroveň důkazu 1)

Komentář: V současnosti zůstávají relevantní mikroskopické metody s relativně nízkou senzitivitou (ne více než 50 % nově diagnostikovaných pacientů s plicní TBC) a neumožňující odlišení MBT od netuberkulózních mykobakterií (NTM) kvůli jednoduchosti a nízké ceně studie. Tyto metody se doporučují pro použití ve všeobecné lékařské síti, protože Používají se k identifikaci epidemicky nejnebezpečnějších pacientů s TBC. V antituberkulózních ústavech jsou mikroskopické metody povinně zahrnuty do všech schémat vyšetření pacientů z důvodu nutnosti zjištění stavu bakteriální exkrece. Kromě toho nám tyto metody umožňují posoudit masivnost bakteriální exkrece a také dynamiku zastavení bakteriální exkrece, protože Mikroskopická vyšetření se provádějí ve všech fázích diagnostiky tuberkulózy a monitorování chemoterapie [23].

— U pacientů s tuberkulózou se doporučuje, aby komplex laboratorních testů k detekci MBT zahrnoval mikrobiologickou (kulturní) studii sputa nebo jiného diagnostického materiálu pro Mycobacterium tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis complex), mikrobiologickou (kulturní) studii ke stanovení citlivosti Mycobacterium tuberculosis (komplex Mycobacterium tuberculosis) na léky proti tuberkulóze. Ke sledování efektivity léčby se během intenzivní fáze provádí jedna studie za měsíc a během pokračovací fáze alespoň jednou za dva měsíce [24–26].

Síla doporučení A (úroveň důkazu 1)

Komentář: Kultivační metody (očkování na pevné a kapalné živné médium) jsou hlavními fenotypovými metodami pro detekci MBT, ale jejich významnou nevýhodou je, že výsledky nejsou získány dříve než 10-14 dní po testu. Kulturní metody se používají stejně jako mikroskopické metody ve všech fázích diagnostiky tuberkulózy a monitorování chemoterapie. Jejich senzitivita a specificita převyšují mikroskopické metody o 20–30 %. Pozitivní výsledky kultivačních metod, ale i mikroskopických, určují stav bakteriální exkrece. Výhodou kulturálních studií je možnost izolace kultury mykobakterií s následnou identifikací a stanovením citlivosti MBT na širokou škálu anti-TB léků.

— Doporučuje se provádět mikrobiologické (kulturní) studie sputa nebo jiného diagnostického materiálu ke stanovení citlivosti komplexu Mycobacterium tuberculosis na antituberkulotika první a druhé linie v tekutých živných půdách s automatickou detekcí růstu [27].

Síla doporučení C (úroveň důkazu 5)

Komentář: Hlavní výhodou kultivačních studií na tekutých médiích pomocí automatizovaných systémů je 2–3násobné zkrácení času potřebného k diagnostice tuberkulózy ve srovnání s tradiční metodou kultivace na hustých živných médiích. Citlivost studií na kapalných médiích je přibližně o 10 % vyšší než na pevných živných médiích. Kvalita výzkumu je zajištěna vysokou efektivitou standardizované a ISO 9001 certifikované výroby činidel a médií, jakož i udržováním standardních výzkumných protokolů [30–33].

— Prioritní složkou výzkumného komplexu u pacientů s tuberkulózou je stanovení mutací spojených s lékovou rezistencí v DNA Mycobacterium tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis complex) se stanovením citlivosti na isoniazid** a rifampicin** nebo alespoň na rifampicin* *. Studie se provádí dvakrát, pokud jsou první výsledky studie negativní, a také pokud je výsledek pozitivní a současně chybí klinické a radiologické známky tuberkulózy [34–38].

Síla doporučení C (úroveň důkazu 1)

Komentář: Hlavní výhodou molekulárně genetických metod (MGM) je, že jsou „rychlé“ a vysoce citlivé, což umožňuje získat výsledky v krátkém (1–2 dny) časovém rámci, na rozdíl od kulturních studií (10–90 dní). ), a mají vysokou citlivost – 75 % (mikroskopická metoda – 50 %). Závěr o přítomnosti MBT v diagnostickém materiálu je učiněn na základě průkazu MBT DNA. Pozitivní výsledky molekulárně genetických metod neurčují stav bakteriální exkrece jako mikroskopické a kultivační metody.

Závěr o lékové rezistenci (DR) při použití MGM je založen na identifikaci mutací v genech spojených s DR. Důležitou výhodou MGM je rychlá a spolehlivá detekce MDR MBT tuberkulózy u pacientů, což umožňuje oddělení toků pacientů a včasné podání IV chemoterapie. Použití MGM ke stanovení DR je počáteční fází vyšetření pacienta a nevylučuje nutnost použití tradičních kulturních metod pro studium drogové citlivosti (DS) MBT [39–44].

— Při provádění molekulárně genetického testování u pacientů s tuberkulózou se pro stanovení taktiky léčby doporučuje stanovit mutace spojené s lékovou rezistencí v DNA Mycobacterium tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis complex) na léky ze skupiny fluorochinolonů [45, 46, 47].

Síla doporučení B (úroveň důkazu 2)

Komentář: Fluorochinolonová léčiva se v léčbě tuberkulózy používají již několik desetiletí, což vedlo ke vzniku a rozšíření farmakorezistentního MBT na tuto skupinu léčiv [48, 49]. Přítomnost lékové rezistence patogenu na fluorochinolony je spojena s nízkou účinností léčby [50]. Stanovení lékové rezistence MBT k lékům fluorochinolonové skupiny umožňuje včasné podání chemoterapie V režimu v případě současné rezistence patogenu na rifampicin** nebo posílení chemoterapie režimu II v případě rezistence patogenu na isoniazid** a citlivosti na rifampicin**.

— Doporučuje se, aby u pacientů s plicní tuberkulózou, kdy je MBT rezistence zjištěna alespoň na rifampicin** molekulárně genetickou metodou a je k dispozici MBT kultivace, byl okamžitě stanoven MBT DS současně s léky 1. a 2. linie proti TBC v za účelem získání údajů o širokém spektru léků proti tuberkulóze. Duplikace studií (na stejném preparátu s použitím různých kultivačních metod) se nedoporučuje [27].

Síla doporučení C (úroveň důkazu 5)

Komentář: Kultivační metoda pro stanovení lékové citlivosti MBT umožňuje stanovit citlivost (DS) na širokou škálu léků proti TBC a předepsat individuální léčebný režim v souladu se získanými výsledky. Podle doporučení WHO se pro stanovení TBC doporučuje několik kulturních metod:

— upravená metoda proporcí na tekutém živném médiu v systému s automatickým účtováním růstu MBT pro léky 1. linie (streptomycin**, isoniazid**, rifampicin**, ethambutol**, pyrazinamid**) a 2. linie léky (#ofloxacin **, levofloxacin**, #moxifloxacin**, ethionamid**, kapreomycin**, #amikacin**, kanamycin**, #linezolid**);

— metoda proporcí na husté živné půdě Lowenstein-Jensen pro léky první linie (streptomycin**, isoniazid**, rifampicin**, ethambutol**) a léky druhé linie (#ofloxacin**, ethionamid** , prothionamid**, kapreomycin**, kanamycin**, kyselina aminosalicylová**, cykloserin**);

— metoda absolutních koncentrací na hustém živném médiu Lowenstein-Jensena pro léky první volby (streptomycin**, isoniazid**, rifampicin**, ethambutol**). U léků druhé volby nebyla metoda absolutní koncentrace validována [1, 2, 31]. Dávkovací režimy pro uvedené léky jsou uvedeny v příloze A41.

Tuberkulóza je infekční onemocnění. Je způsobena vstupem tuberkulózního mykobakteria (Mycobacterium tuberculosis), známého také jako Kochův bacil, do těla. Nejčastěji jsou postiženy plíce, ale někdy jsou postiženy i jiné orgány a systémy těla. Možnosti moderní medicíny nyní umožnily identifikovat vývoj onemocnění v raných stádiích a úspěšně s ním bojovat. Infekce tuberkulózou z nemocného na zdravého člověka se obvykle přenáší vzduchem, když se odpovídající bakterie nemoci dostanou do prostředí při kašli nebo kýchání.

Statistiky ukazují, že až 25 % světové populace je infikováno bakteriemi tuberkulózy. Ale nemusí být nutně považováni za nemocné a nakažlivé. Tato šance vzniká pouze u lidí s oslabeným imunitním systémem. Nebezpečí onemocnění spočívá v tom, že ani v aktivní fázi nemusí pacient dlouhodobě pociťovat známky patologie v podobě kašle, hubnutí, slabosti, zvýšeného pocení apod. Nicméně i v tomto období např pacienti představují nebezpečí pro společnost, protože mohou nakazit až patnáct lidí, se kterými se často stýkají.

Známky nemoci

Vzhledem k tomu, že onemocnění má podobné příznaky jako onemocnění dýchacích cest, které se navenek nemusí projevit několik měsíců, mohou tuberkulózu diagnostikovat pouze zkušení odborníci. Hlavní příznaky patologie;

• zvýšené pocení během spánku;
• rychlá únava, svalová slabost;
• suchý kašel, pokud je onemocnění pokročilé – vykašlávání krve;
• je možné mírné zvýšení celkové teploty.

Komu hrozí infekce?

Všichni jsme vystaveni riziku nákazy tuberkulózou, když jsme na přeplněných místech, ve veřejné dopravě, v obchodech a dalších místech, kde je možnost pacientů s aktivní formou onemocnění. Ale nejvíce ohroženi záchytem Kochova bacila jsou lidé s nízkou imunitou nebo ti, kteří jsou nuceni s takovými pacienty systematicky přicházet do kontaktu.

Odborníci na tuberkulózu zahrnují do rizikové skupiny:

• ti, kteří byli v kontaktu s pacientem;
• pacienti s AIDS;
• pacienti s autoimunitními patologiemi po kombinované léčbě imunosupresivy;

Kromě toho faktory, které zvyšují pravděpodobnost rozvoje tuberkulózy, zahrnují:

• nepříznivá ekologie;
• špatné sociální životní podmínky;
• nedostatek adekvátní výživy;
• zneužívání alkoholu, kouření a jiné špatné návyky, které oslabují imunitní systém;
• systematické stresové situace.

Jak zjistit tuberkulózu?

Test TB-Feron se používá k účinné diagnostice přítomnosti tuberkulózní infekce v těle. Principem jeho působení je stanovení množství interferonu-gama, který je syntetizován senzibilizovanými T-lymfocyty v reakci na mycobacterium tuberculosis.

Ke stimulaci buněčné odpovědi v T-lymfocytech se používá směs rekombinantních proteinových antigenů (ESAT-6, CFP-10, TB-7.7), které nejsou obsaženy v BCG vakcíně. Proto test TB-Feron neindukuje imunitní reakce spojené s BCG vakcinací, čímž se zabrání falešně pozitivním výsledkům.

Testovací systém TB-Feron využívá rekombinantní proteiny plné délky s více místy specificity, díky nimž jsou T-lymfocyty stimulovány efektivněji a samotný test má vysoké diagnostické vlastnosti.

Odeslání testu a interpretace výsledků

Vzorky žilní krve pro testování se odebírají nalačno. Test TB-Feron se používá k diagnostice tuberkulózní infekce namísto kožních testů na žádost pacienta, stejně jako v případě kontraindikací kožních testů. Na základě výsledků testů odborník učiní odůvodněný závěr, že:

• výsledek je negativní;
• výsledek je pozitivní;
• výsledek odpovědi na TB antigen je sporný;
• infekce M. tuberculosis je pravděpodobná;
• infekce tuberkulózy je nepravděpodobná.

U pacientů se známkami aktivní TBC pozitivní výsledek testu potvrzuje infekci, zatímco negativní výsledek ukazuje na nutnost dalšího testování k vyloučení nebo potvrzení TBC.

Pozornost! Informace uvedené v tomto článku slouží pouze pro informační účely a jsou určeny pro vzdělávací účely. Materiály zveřejněné na webových stránkách MC „Léčitel“ nenahrazují konzultaci s odborníkem a nelze je použít jako lékařskou radu. Nepodávejte samoléčbu! Pokud se váš zdravotní stav zhorší a objeví se první příznaky onemocnění, měli byste se poradit s lékařem!