Jak se otestovat na listeriózu?

Listerióza je v praktickém zdravotnictví málo známá, ačkoli historie jejího studia sahá více než 100 let do minulosti. Tato infekce se vyskytuje na všech kontinentech, v zemích s odlišnými socioekonomickými a klimatickými podmínkami. Veterinářům je dobře známá, protože. Je rozšířen především mezi divoká a domácí zvířata a poměrně zřídka postihuje člověka.

Vzácné zprávy o listerióze u lidí jsou také spojeny s malým počtem praktických laboratoří schopných izolovat listerii nebo detekovat protilátky proti ní. Navzdory relativně nízkému výskytu lidské nemocnosti jsou často zaznamenávána úmrtí u nemocných lidí a mezi novorozenci – dokonce v 70-80%.

Listerióza představuje největší nebezpečí pro těhotné ženy, protože vede k potratu, porodu mrtvého dítěte, předčasnému porodu a časné novorozenecké úmrtnosti. Kromě těhotných žen a novorozenců postihuje listerióza nejčastěji starší a senilní osoby, u kterých jsou zaznamenány nejtěžší formy onemocnění – septická a meningoencefalitická. Často také onemocní lidé všech věkových kategorií s narušenou imunitou a oslabení jinými předchozími nemocemi. Jedná se především o osoby trpící rakovinou, infekcí způsobenou virem imunodeficience (AIDS, infekce HIV), osoby dlouhodobě užívající kortikosteroidy, léky tlumící imunitní systém při transplantaci orgánů a tkání. Rizikovou kategorii v posledních letech doplňuje početná skupina mladých lidí – drogově závislých, závislých na nitrožilně podávaných lécích, které výrazně ničí imunitní systém. Ve všech těchto případech je přidružená listerióza často posledním článkem vedoucím ke smrti.

Původcem onemocnění je Listeria monocytogenes, malá pohyblivá tyčinka, která netvoří spory a dobře se barví pomocí Gramovy metody. Patří do skupiny korynebakterií, mezi nimiž je nejznámější difterický bacil, proto bakteriologové často zpočátku diagnostikují listerii jako záškrt (tj. obdobu záškrtu) a teprve v důsledku dodatečného výzkumu tyto bakterie od sebe odliší.

Listeria má bičík, který pomáhá při pohybech, dokáže vytvořit pouzdro a parazitovat uvnitř buněk. Je schopen se množit při 4-6°C v půdě, vodě, rostlinách a potravinách. Proto se Listeria dokáže hromadit během skladování potravin v domácích ledničkách, kdy mnoho dalších bakterií zemře nebo se přestane množit a nesoupeří o výrazné zvýšení mikrobiální hmoty Listerie. Tato vlastnost mikrobů vysvětluje běžný název Listeria jako „chladničkový mikrob“. V tomto ohledu uchovávání kontaminovaných potravin v lednicích nezabrání, ale často naopak přispívá k listerióze u lidí při absenci dodatečného zpracování takových produktů. Stejně tak solení zeleniny, mléčných a masných výrobků, které škodí mnoha mikrobům, napomáhá přemnožení listerií, které snesou 6-20% koncentraci kuchyňské soli.

Zároveň rychle hynou při teplotě varu, i když při 62 °C umírají až po 35 minutách. Listerie však snášejí i vysoké teploty, protože se nacházejí uvnitř buněk nebo tkání. V Kanadě a řadě evropských zemí byly tak pozorovány ohniska potravinové listeriózy způsobené konzumací pasterovaného mléka, které nebylo předcentrifugováno, a listerie přežívaly v jednotlivých leukocytech a epiteliálních buňkách nalezených v sedimentu po centrifugaci. Na otevřených površích způsobují jejich smrt běžné dezinfekční prostředky (formaldehyd, bělidlo) a také sluneční záření.

Nejčastěji k infekci dochází kontaktem s nemocnými zvířaty a drůbeží nebo konzumací infikovaných živočišných nebo rostlinných produktů, kontaminovaných zvířecími sekrety nebo půdou – obvyklým prostředím Listeria. Z takových výrobků jsou nejnebezpečnější saláty ze syrového zelí, měkké sýry a masné polotovary včetně drůbeže. Syrové maso a masné výrobky mohou být kontaminovány z 30–50 %. Možnost nákazy listeriózou se výrazně zvyšuje v případech profesionálního kontaktu člověka se zvířaty, drůbeží nebo surovinami. Rizikovou skupinu proto tvoří pracovníci v chovech hospodářských zvířat, drůbežích, masokombinátech, mlékárnách, potravinářských provozech a dalších.

Přestože potravní cesta pronikání listerií do lidského těla je hlavní, neměli bychom zapomínat, že mohou pronikat i jinými cestami – polétavým prachem přes sliznice dýchacích cest, přes spojivky oka a poškozenou kůži . Zdrojem infekce je často také nemocný člověk nebo přenašeč bakterií, který listerii vylučuje močí, stolicí, poševním a jiným sekretem. Zvláště nebezpeční jsou asymptomatičtí nosiči nebo osoby trpící mírnými a subtilními (klinicky nevyjádřenými) formami onemocnění. V posledních letech byla zjištěna dlouhodobá přítomnost listerií v orgánech a sekretech urogenitálního traktu. V důsledku toho se infekce přenáší z matky na plod in utero (prostřednictvím placenty) nebo infekce novorozence během porodu. Infekce plodu se může objevit v kterékoli fázi těhotenství, nejčastěji se však vyskytuje v jeho poslední třetině. Ženy a novorozenci po porodu mohou vylučovat patogen během prvních dvou týdnů po porodu. Často proto mohou být při nedodržování hygienických opatření a nedostatečné dezinfekci sekretů pacienta zdrojem nozokomiální listeriózy.

Vzhledem k širokému rozšíření listerií v lidském prostředí a možnosti nakažení vymazanými a mírnými formami onemocnění je přirozená náchylnost k listerióze nízká a jak je uvedeno, kromě novorozenců a těhotných žen především lidé nad 60 let. věku a také ti s nedostatkem buněčných imunitních faktorů. Listerióza je obvykle pozorována na jaře a v létě, často ve formě sporadických onemocnění. Skupinová nemocnost a epidemie jsou způsobeny především konzumací potravin infikovaných listerií.

Listerióza je charakterizována řadou klinických projevů, variant průběhu a výsledků onemocnění. Inkubační doba, tzn. Doba od nakažení do objevení se prvních příznaků onemocnění se také liší – od 3–5 dnů u novorozenců do 2 měsíců, nejčastěji však při kontaminaci potravinami 2–3 týdny.

Ve většině případů je registrována gastroenterická forma, která se projevuje nevolností, zvracením, bolestmi břicha, průjmem, obvykle doprovázeným zvýšením tělesné teploty na 38-39°C. Listerióza může být omezena na indikované příznaky, ale často po 3-4 dnech se stav pacienta náhle prudce zhorší a jsou detekovány známky poškození centrálního nervového systému (CNS) ve formě meningitidy, encefalitidy nebo jejich kombinace.

Na původ listerie je třeba myslet především v případě meningitidy rozvíjející se u lidí nad 50 let, po prodělané gastroenteritidě, dále u lidí trpících lymfomem, po transplantaci orgánu nebo užívajících kortikosteroidy. Ačkoli je obecně klinický průběh meningitidy zcela typický, existují některé znaky, které charakterizují její listeriovou povahu. Na rozdíl od meningitidy způsobené jinými bakteriemi jsou u listeriové meningitidy častěji pozorovány křeče, ztráta koordinace pohybů, třes a narušený psychický stav. Rigidita šíjových svalů nemusí být zjištěna téměř u poloviny pacientů, změny v mozkomíšním moku nejsou tak výrazné jako u jiných hnisavých meningitid.

Listeria meningitis je zpravidla kombinována se současným poškozením mozkové substance, tzn. jsou v podstatě meningoencefalitidy, ve všech případech jsou extrémně závažné a ve 25–30 % případů končí smrtí.

Další formou poškození centrálního nervového systému v důsledku listeriózy jsou mozkové abscesy, které jsou obvykle subkortikální a také často končí smrtí nebo vážnými komplikacemi v podobě paréz, ochrnutí a psychických poruch. Ve většině případů poškození centrálního nervového systému se listerie nachází u pacientů v krvi, často i v mozkomíšním moku, tzn. existuje septická forma listeriózy. Posledně jmenované se mohou projevit i jako hnisavá ložiska v různých orgánech a pak je diagnostikována endokarditida, perikarditida, peritonitida, osteomyelitida, pleuropneumonie, jaterní abscesy, slezina atd. Ve všech těchto případech je zaznamenána zimnice, výrazné kolísání tělesné teploty, zvětšení jater a sleziny a často se rozvíjí septický šok se sekundárním selháním ledvin, diseminovanou intravaskulární koagulací a respiračním selháním, které společně způsobují smrt.

Listerióza se mnohem snadněji vyskytuje u těhotných žen, u kterých zpravidla nepostihuje centrální nervový systém, obvykle připomíná akutní respirační infekci a je doprovázena horečkou, bolestmi svalů, kloubů, kříže a hlavy. Připomeňme, že listerióza sice nepředstavuje vážné ohrožení života těhotné ženy, ale je extrémně nebezpečná pro vývoj plodu, vede k narození mrtvého plodu a předčasnému porodu. Vzhledem k tomu, že se onemocnění obvykle rozvíjí v posledních měsících těhotenství, kdy se již plod vytvořil, je jeho septická léze doprovázena mikroabscesy a specifickými formacemi (granulomy) v placentě, játrech a slezině plodu. Pokud se dítě narodí živé, pak má hnisavou konjunktivitidu, rozšířenou papulární vyrážku, bakteriémii, jsou postiženy hlavní orgány a systémy, což ho činí neživotaschopným během 2-3 dnů.

Pokud listerióza nestihla infikovat placentu a plod se nakazil během porodu, pak u některých dětí bez rozvoje sepse je po 2-3 týdnech diagnostikována meningitida nebo meningoencefalitida s těžkým průběhem.

Diagnostika listeriózy představuje značné obtíže vzhledem k rozmanitosti klinických projevů a podobnosti s řadou dalších častějších onemocnění (toxoplazmóza, syfilis, herpetická, cytomegalovirová, stafylokoková infekce, yersinióza aj.). Proto nelze diagnózu stanovit pouze na základě klinického obrazu. Anamnestické údaje, včetně epidemiologických údajů, v kombinaci s charakteristickým klinickým obrazem mohou naznačovat pouze listeriózu. K potvrzení diagnózy je nutné laboratorní vyšetření krve, stolice, moči a sekretu pacienta, které spočívá v průkazu listerií nebo nálezu specifických protilátek v krevním séru, jejichž hladina se v průběhu onemocnění zvyšuje.

Léčba listeriózy není vždy úspěšná, protože. Diagnóza je většinou stanovena pozdě a Listeria se vyznačuje rychlým šířením a poškozením centrálního nervového systému, kde je obtížný přístup k lékům. Z antibiotik je k potlačení listerií nejúčinnější ampicilin, který se v těžkých případech předepisuje v kombinaci s gentamicinem nebo biseptolem. Léčba by měla být dlouhodobá (až 6 týdnů) v případech sepse, meningoencefalitidy nebo mozkových abscesů. Protože se listerióza zpravidla vyvíjí na pozadí imunitní nedostatečnosti, je indikováno podávání imunokorekčních léků: imunofan, thymalin, myelopid, imunoglobuliny atd. V komplexní terapii listeriózy se používají detoxikační roztoky, dehydratační činidla (mannitol, furasemid), krevní plazma a symptomatická činidla.

Prevence listeriózy spočívá v provádění veterinárních, hygienických a hygienických opatření v obydlených oblastech, v chovech hospodářských zvířat a podnicích na zpracování produktů živočišného původu. Protiepidemická opatření zajišťují oddělené uchovávání syrových a polotovarů, povinnou tepelnou úpravu masných a mléčných pokrmů a bakteriologické vyšetření pracovníků stravovacích provozů, zemědělsko-průmyslových komplexů a masných a mlékárenských provozů.

Těhotné osoby nebo osoby ohrožené by měly být vyloučeny z prací souvisejících s péčí o zvířata nebo o suroviny a produkty z nich získané. Měli by si dávat pozor, aby nekonzumovali syrové nebo nedostatečně tepelně upravené mléčné a masné výrobky, stejně jako nemytou a hnijící zeleninu. Pro prevenci listeriózy u novorozenců podléhají těhotné ženy s nepříznivou porodní anamnézou povinnému screeningu na listeriózu. Pokud se zjistí, že přenášejí bakterie nebo mají lokální infekci, měli by být léčeni antibiotiky. Generalizovaná listeriová infekce je indikací k ukončení těhotenství.

V.V. MALEEV, profesor,
Ústřední výzkumný ústav epidemiologický
Ministerstvo zdravotnictví Ruska

Listerióza je infekční onemocnění, které způsobuje nejvirulentnější alimentární infekce. Listerióza je běžná u zvířat i lidí. Vyznačuje se mnoha zdroji infekce, různými cestami a faktory jejího přenosu, mnohočetnými formami projevů a vysokou mortalitou. Listerióza celosvětově postihuje tisíce lidí, z nichž 20 až 30 % zemře. Úmrtnost na těžké běžné formy onemocnění dosahuje 90 – 100 %. Včasná diagnostika listeriózy umožňuje předepsat adekvátní léčbu, která zajistí pacientovi úplné vyléčení.

Rýže. 1. Na fotografii je pacient s listeriovou meningitidou.

Polymorfismus klinických projevů a nemožnost identifikace zdroje infekce v některých případech vytváří výjimečné obtíže při stanovení diagnózy na základě klinických a epidemiologických dat. V tomto ohledu se stává zásadní laboratorní diagnostika listeriózy. Předběžná diagnóza je stanovena na základě bakterioskopického vyšetření, konečná diagnóza vyžaduje bakteriologické potvrzení nebo PCR.

Pro výzkum používáme:

• Vzorky krve, nosohltanový hlen, výtok z očí, punkce lymfatických uzlin, stolice.
• U žen, které porodily mrtvé dítě nebo se známkami listeriózy, se vyšetřuje placenta, plodová voda a výtok z porodních cest.
• Meconium je testováno u novorozenců.
• U pacientů s podezřením na listeriovou meningitidu se vyšetřuje mozkomíšní mok.
• Z mrtvol se odebírá nejrůznější biologický materiál.
• Pro stanovení bakteriálního nosičství se odebírají výkaly a orofaryngeální výtěry.

Diagnostika listeriózy pomocí prosté a fluorescenční mikroskopie

Rýže. 2. Pohled na Listerii pod mikroskopem. Bakterie jsou umístěny jednotlivě nebo v párech, méně často v krátkých řetězcích. Při obarvení Gramovým barvivem se Listeria jeví jako růžová.

Rýže. 3. Listerie ve světle mikroskopu, který poskytuje trojrozměrné zvětšení, vypadá jako válce.

Rýže. 4. Listerie v makrofázích.

Mikroskopie listeriových granulomů

Snížení fungování buněčné imunity vede k šíření infekce po celém těle. V orgánech a tkáních se tvoří specifické granulomy — listeriomy. Jejich specifické složení je určeno mikroskopií nátěru nebo biopatu.

Rýže. 5. Granulomy v játrech (foto vlevo). Granulom (listeriom) v mozku (foto vpravo).

Názor lékaře:

Diagnostika listeriózy je komplexním a důležitým krokem k zajištění účinné léčby tohoto onemocnění. Lékaři jsou povinni vzít v úvahu klinické příznaky, výsledky laboratorních a instrumentálních studií a také anamnézu kontaktu s možnými zdroji infekce. Klíčovými metodami pro diagnostiku listeriózy jsou bakteriologické vyšetření, polymerázová řetězová reakce (PCR) a sérologické testy. Je důležité si uvědomit, že včasná diagnóza umožňuje zabránit rozvoji komplikací a poskytnout adekvátní léčbu.

Laboratorní diagnostika listeriózy pomocí bakteriologického vyšetření

Listeria roste při pokojové teplotě na běžných živných půdách – mírně zásaditých a neutrálních. Plodiny se doporučuje provádět v prvních 7 – 10 dnech onemocnění. Inkubace trvá 3 týdny při teplotě 37 °C. Při nanášení na glukózo-krevní agar se vyberou typické kolonie (průhledné nebo rohovité), které produkují hemolýzu.

Rýže. 6. Kolonie Listeria při výsevu na masový peptonový agar připomínají kapky rosy. V procházejícím světle získávají kolonie perleťový odstín.

Rýže. 7. Když Listeria roste na chromogenním agaru, získávají kolonie modrou barvu.

Rýže. 8. Při pěstování na Oxfordském agaru se kolem kolonií tvoří černé halo.

Rýže. 9. Když Listeria roste v masovo-peptonovém vývaru, vytváří se zákal s mírnou opalescencí.

Diagnostika listeriózy pomocí biologických vzorků

Biologické testy jsou založeny na infikování laboratorních zvířat biologickým materiálem odebraným od pacienta za účelem zjištění bakterií. Bílé myši, králíci, morčata a stepníci jsou vystaveni infekci.

Rýže. 10. Na fotografii jsou bílé myši infikované listeriózou. Uprostřed je zdravá myš. Napravo a nalevo od něj jsou kojené myši s ochrnutím předních nohou.

Rýže. 11. Na fotografii vlevo se listerióza u králíka rozvinula po nitrožilní infekci. Fotografie vpravo ukazuje zánětlivou reakci, která se vyvinula v místě intradermální injekce Listeria.

Názor pacienta

Při podezření na listeriózu se mnoho lidí obrací na zkušenosti ostatních, aby získali informace o příznacích, diagnóze a léčbě nemoci. Lidé často sdílejí své zkušenosti na fórech a sociálních sítích, diskutují o tom, jaké testy jim byly předepsány, jaké příznaky pozorovali a jak probíhala léčba. Tato zkušenost může být užitečná pro ty, kteří čelili podobným problémům, pomůže jim pochopit, co dělat v podobné situaci a jak vyhledat lékařskou pomoc.

Protilátky proti listeriím

Protilátky proti listeriím se stanovují pomocí sérologických reakcí: aglutinační reakce (RA), nepřímá hemaglutinační reakce (IRHA) a reakce fixace komplementu (CFR) s listeriovým antigenem v párových sérech. Pokud má pacient listeriózu, zaznamená se zvýšení titru 4krát nebo více. Reakce se provádějí dvakrát s 2týdenní přestávkou.

Vzhledem k antigennímu vztahu Listeria a Staphylococcus mohou být získány falešně pozitivní výsledky.

Po 2 týdnech od začátku onemocnění jsou v krvi pacienta detekovány protilátky IgG, které jsou v krvi přítomny po celou dobu onemocnění. Protilátky při chronické listerióze zůstávají v krvi dlouhou dobu.

Fluorescenční protilátková metoda

Imunofluorescenční reakce (RIF) je rychlá a vysoce citlivá metoda pro diagnostiku listeriózy. Existuje přímá a nepřímá metoda RIF. Při stanovení protilátek přímou metodou se k suspenzi mikrobů fixované na podložní sklíčko přidá sérum značené fluorochromem. Když se pod modrofialovým (ultrafialovým) světlem vytvoří komplex antigen-protilátka, bakterie září pod fluorescenčním mikroskopem jasně zeleně.

Rýže. 12. Záře Listeria během imunofluorescenční reakce.

Krev na listerii

Krevní test na Listerii je účinný způsob, jak odhalit infekci listerií. U různých forem listeriózy se v těle pacientů aktivuje systém mononukleárních fagocytů – makrofágů. Zachycují a ničí bakterie a viry žijící intracelulárně, čtou informace o jejich struktuře a předávají je T-lymfocytům. Následně B lymfocyty začnou produkovat protilátky, které zničí patogen. S onemocněním se zvyšuje počet monocytů v periferní krvi. U septické formy listeriózy dosahuje jejich počet 70 % (s normou 3 – 11 %).

Rýže. 13. Na fotografii jsou monocyty největšími buňkami v periferní krvi.

Intradermální test na listeriózu

K diagnostice listeriózy se používá intradermální (alergický) test. Antigen Listeria se podává intradermálně. Po 24 hodinách se reakce studuje. Pokud je listerie přítomna v těle testované osoby, objeví se na kůži v místě zavedení listeriového antigenu papule (infiltrát) o velikosti 10 a více milimetrů.

Intradermální test se provádí 6.–9. den od okamžiku onemocnění.

V případě ojedinělých případů listeriózy by měla být diagnóza onemocnění provedena pomocí bakteriologické metody a metody PCR.

Diferenciální diagnostika listeriózy

Diferenciální diagnostika listeriózy se provádí s přihlédnutím k rozvinuté klinické formě onemocnění.

• Listeriová tonzilitida by měla být odlišena od streptokokové tonzilitidy.
• Akutní formy listeriózy je třeba odlišit od erythema infectiosum, infekční mononukleózy, akutní toxoplazmózy a krevních chorob.
• Nervové formy listeriózy je třeba odlišit od bakteriálních meningitid různé etiologie – pneumokokové, meningokokové, stafylokokové.
• Listeriózu u těhotných žen je třeba odlišit od pomalé pyelocystitidy a pyelonefritidy.

Listerióza je nebezpečná bakteriální infekce. Informace od vědců.

Často kladené dotazy

Jaké příznaky naznačují možnou infekci listeriózou?

Infekce listeriózou se může projevovat různými příznaky, včetně horečky, bolesti svalů, bolesti hlavy, nevolnosti a průjmu. U těhotných žen může infekce vést k předčasnému porodu nebo infekci plodu.

Jaké metody lze použít k diagnostice listeriózy?

K diagnostice listeriózy lze použít různé metody, včetně technik krve, moči, stolice, kultivace a molekulární biologie.

Jaké jsou možné důsledky pozdní diagnózy listeriózy?

Opožděná diagnóza listeriózy může vést k závažným komplikacím zejména u těhotných žen a také u lidí s oslabeným imunitním systémem. Proto je důležité, pokud máte podezření na infekci listeriózou, neprodleně se poradit s lékařem.

Užitečné tipy

TIP #1

Při prvních známkách onemocnění, jako je horečka, bolest hlavy, svalů a průjem, kontaktujte svého lékaře.

TIP #2

Vyhněte se konzumaci nepasterizovaných mléčných výrobků a syrového masa, abyste předešli možné infekci listeriózou.

TIP #3

Příprava jídla by měla být prováděna s maximální opatrností, důkladně omýt zeleninu a ovoce a vyhnout se kontaktu se syrovými potravinami při vaření.