Lupus antikoagulant v analýze krve a jeho diagnostická hodnota. Systémový lupus erythematodes (SLE)

Analýza zaměřená na identifikaci tzv. LE buněk neboli buněk systémového lupus erythematodes (SLE) neboli buněk lupusu v krvi je jedním z laboratorních diagnostických testů tohoto onemocnění. LE buňky jsou morfologickými markery systémového autoimunitního onemocnění, SLE. Jsou to neurofilní leukocyty se specifickou morfologií, exprimované v přítomnosti fagocytovaných fragmentů buněčných jader ve formě bezstrukturního homogenního útvaru a jádra samotného neurofilu, posunutého na periferii a majícího obrys srpku.

Tvorba takových buněčných struktur je výsledkem imunologických jevů charakteristických pro systémový lupus erythematodes a vyskytuje se v krevní plazmě v přítomnosti speciální frakce imunoglobulinů, LE faktoru, který má antinukleární aktivitu. Skutečnost, že buňky lupusu jsou detekovány v krvi, ukazuje na přítomnost antinukleárních protilátek v plazmě, což je zase indikátorem autoimunitní povahy onemocnění.

LE buňky jsou detekovány u 40–90 % případů SLE a výrazně méně často (ne více než 10 %) u jiných onemocnění autoimunitní povahy, a to jak v krvi, tak v pleurálních, perikardiálních, peritoneálních výpotcích a v mozkomíšním moku. Vzhled buněk lupusu v krvi pacientů je typický v počátečních stádiích onemocnění, stejně jako během období exacerbace, jejich počet závisí na závažnosti onemocnění. Užívání léků může vést ke snížení počtu LE buněk detekovaných v krevní plazmě až k jejich úplnému vymizení.

Indikace pro analýzu

Analýza pro detekci LE buněk v krvi je určena:

1. pro laboratorní diagnostiku systémového lupus erythematodes;
2. k posouzení účinnosti zvoleného postupu léčby.

Metodologie analýzy

Analýza zahrnuje detekci buněk lupusu v krevním nátěru pacienta pomocí mikroskopického vyšetření.

Jako materiál pro výzkum se používají: žilní krve, odebraná pacientovi ráno nalačno a umístěná do zkumavky s EDTA jako antikoagulantem, před zahájením lékové terapie.

Tato analýza se provádí pomocí Metoda Zinckhom-Conley, modifikovaná E.N. Novoselovou. Technika spočívá v umístění čerstvě odebrané krve od pacienta do zkumavky obsahující antikoagulant EDTA. V důsledku celé řady manipulací včetně inkubace krvinek, mechanického působení na ně, podpory tvorby LE buněk, centrifugace se izoluje leukocytová hmota, ze které se získávají léky. Jsou fixované a obarvené hematologickými barvivy. Metoda je poměrně pracná a má určitý práh citlivosti, specificity a reprodukovatelnosti.

Výsledky výzkumu a jejich interpretace

Absence LE buněk ve vzorcích krve je normální.

Detekce buněk lupusu indikuje přítomnost autoimunitních onemocnění:

• systémový lupus erythematodes – z jednotlivých buněk, střední počet z nich, velký počet, v závislosti na stupni onemocnění;
• systémová sklerodermie, smíšená onemocnění pojiva, chronická hepatitida v aktivní fázi, dermatomyozitida, revmatoidní artritida – v malých množstvích, neustále.

Test na zjištění přítomnosti nebo nepřítomnosti LE buněk v krvi je jedním z diagnostických testů na systémový lupus erythematodes, který se provádí v kombinaci s dalšími specifickými testy.

Vlastnosti a výhody testu detekce buněk LE

Bílé krvinky, jejichž jádra jsou zničena speciálním typem plazmatické bílkoviny, LE faktorem, který se objevuje v krevním řečišti při autoimunitních procesech, se nazývají Lupus erythematodes (neboli LE buňky). Jejich přítomnost ukazuje na nedostatečnou imunitní odpověď spojenou s přítomností v lidském těle cirkulující fagocytární látky s antinukleární aktivitou – imunitního komplexu, který zahrnuje zbytky jaderných složek (nukleoproteiny) a imunoglobulinový izotyp G do histonového komplexu. Jejich činnost vede k:

• přechod do kondenzovaného stavu hlavního strukturního prvku buněčného jádra – chromatinu;
• uvolňování jaderného materiálu z leukocytů;
• usazování fagocytovaných homogenních útvarů na površích kloubů, cévních stěn a ledvinových tkání.

Ve většině případů (téměř 85 %) dochází k tvorbě LE buněk v časných fázích rozvoje těžké autoimunitní patologie – systémového lupus erythematodes. Toto onemocnění je charakterizováno řadou klinických projevů, z nichž hlavní jsou:

• horečka;
• erytém, který se objevuje na obličeji a má motýlovitý vzhled, který se zesiluje vystavením ultrafialovým paprskům;
• tvorba vředů na sliznici ústní dutiny;
• křehkost nehtových desek;
• alopecie (vypadávání vlasů);
• ranní ztuhlost kloubů;
• zvyšující se klidová artralgie;
• diskoidní vyrážky na kůži hrudníku a předloktí;
• hypersenzitivní pneumonitida je imunologicky způsobený zánětlivý proces vyskytující se v plicním parenchymu;
• perikarditida – zánět serózní membrány srdečního svalu;
• epileptické záchvaty;
• lupusová nefritida – ztluštění bazální membrány ledvinových glomerulů.

SLE je provázen změnami krevních parametrů – pacient má hemolytickou anémii, pokles počtu leukocytů, krevních destiček, lymfocytů a přítomnost protilátek proti dvouvláknové DNA a fosfolipidům, antinukleární faktor, jehož působení je zaměřeno na složky tělu vlastních jader buňky.

Je poměrně obtížné diagnostikovat systémový lupus erythematodes včas, charakteristickým znakem této patologie jsou imunologické poruchy. Laboratorní testy jsou součástí komplexního diagnostického algoritmu. Přítomnost LE buněk lze prokázat v různých biologických tekutinách pacienta – krvi, červené kostní dřeni, mozkomíšním moku, moči, tekutinách nahromaděných v pleurální a kloubní dutině. Testy, které umožňují jejich detekci, slouží jak k diagnostice a klinickému odlišení SLE od jiných onemocnění, tak ke sledování úspěšnosti terapeutických opatření – při zlepšení stavu pacienta je pozorováno výrazné snížení nebo úplné vymizení patologických buněčných elementů.

Abyste se vyhnuli diagnostickým chybám, je důležité pochopit, jak správně interpretovat konečná data výzkumu. Vysoké hladiny LE buněk lze nalézt nejen u SLE, ale také u nemocí, jako jsou:

• revmatoidní artritida je chronický zánět kloubních tkání, ke kterému dochází s deformací kostních kloubů, jejich otoky a bolestmi a omezením rozsahu pohybu;
• autoimunitní hepatitida je chronický nekroticko-zánětlivý proces vyskytující se v jaterní tkáni, jeho progrese vede k rozvoji cirhózy;
• systémová sklerodermie je patologie pojivové tkáně charakterizovaná poškozením kůže obličeje a distálních končetin, krevních cév, vnitřních orgánů (nejčastěji jícnu, plic, srdce, jater);
• Polymyozitida je difúzní zánět svalové tkáně, kůže, kloubů, trávicího traktu, srdečního svalu, ledvin a plic.

Jiné systémové patologické stavy (hemolytická a perniciózní anémie, periarteritis nodosa, plazmocytom, erytrodermie, miliární tuberkulóza, polékový lupus-like syndrom, akutní revmatismus a akutní leukémie) jsou doprovázeny přítomností LE buněk ve velmi malých koncentracích, takže imunologický test pro jejich detekci má pouze pomocný diagnostický význam. Získání negativního výsledku testu však nevylučuje přítomnost jakéhokoli onemocnění z výše uvedeného seznamu u pacienta – buňky lupusu mohou v raných fázích patologického procesu chybět a nemusí být detekovány při těžké proteinurii (vylučování velkého množství bílkovin v moči).