Diplokoky v nátěru u žen: důvody vzhledu, co to je?

Bakterioskopie, tzn. Pozorování bakterií pod mikroskopem je jednou z laboratorních výzkumných metod, hojně využívaných v dispenzárních podmínkách pro diagnostiku infekčních onemocnění, hnisavých zánětů, ale i pro vyšetření gynekologických stěrů.

Pomocí bakterioskopie lze ve zkoumaném materiálu detekovat přítomnost bakterií, prvoků, parazitů, plísní a určit následující morfologické znaky:

• tvar bakterií;
• jejich velikosti;
• umístění;

a také získat data jako:

• množství;
• reakce na barviva (tj. ta, která si zachovávají barvu (grampozitivní) a ta, která si barvu nezachovávají (gramnegativní)).

Tato studie je určena k bakterioskopickému vyšetření stěrů z urogenitálního traktu mužů a ze tří lokalizací u žen – z močové trubice, cervikálního kanálu a pochvy.

Ženщины

Normální mikroflóra ženských urogenitálních orgánů zahrnuje asi 40 druhů mikroorganismů, z nichž 95–98 % tvoří bakterie mléčného kvašení (laktobacily). Díky jejich schopnosti produkovat kyselinu mléčnou a peroxid vodíku se v pochvě vytváří kyselé prostředí s pH 3,8-4,5, které zabraňuje množení patogenních bakterií.

Kromě laktobacilů se v pochvě ženy běžně mohou nacházet stafylokoky, korynebakterie, klebsiella, E. coli, gardnerella a také mikroorganismy nevyžadující kyslík (anaeroby) – bacteroides, prevotella, mikrokoky, vibria rodu Mobilincus, enterokoky, peptokoky, peptostreptokoky a veillonella, klostridie, eubakterie, kampylobaktery, fusobakterie. Kromě toho je povolena přítomnost malého množství kvasinkovité houby Candida.

Při poklesu hladiny bakterií mléčného kvašení dochází k narušení rovnováhy mikroflóry, což se projevuje nárůstem počtu oportunních bakterií (jako jsou např. E. coli, stafylokoky, streptokoky aj.). K nerovnováze flóry může dojít v důsledku zanedbávání pravidel osobní hygieny, hormonální nerovnováhy (zejména v důsledku nedostatečné hladiny ženských hormonů – estrogenů), metabolických poruch a užívání širokospektrých antibakteriálních látek. Nerovnováha v mikroflóře může vést k rozvoji vaginální dysbiózy. Tento stav je plný řady patologických stavů, jako jsou:

• mimoděložní těhotenství;
• spontánní potrat;
• předčasný porod;
• neplodnost;
• zánět dělohy a příloh.

Bakterioskopie nátěru u žen nám umožňuje vyvodit závěr o obecné mikrobiální kontaminaci, stavu epiteliální vrstvy pochvy, identifikovat a určit stupeň závažnosti zánětlivého procesu, diagnostikovat onemocnění, jako je trichomoniáza, kapavka, bakteriální vaginóza.

Normálně by nátěr měl obsahovat:

• dlaždicové epiteliální buňky (buňky vystýlající vnitřní povrch urogenitálního traktu; jejich nepřítomnost nebo velmi malý počet může znamenat atrofii epiteliálních buněk, nedostatek estrogenu, nadbytek mužských pohlavních hormonů; pokud je jich velké množství, existuje riziko rozvoj zánětu);
• hlen (povinný prvek vzorku, který by měl být přítomen v mírném množství; jeho příliš mnoho nebo příliš málo dává důvod k podezření na zánětlivý proces);
• bacily (jsou představiteli normální poševní mikroflóry; malý počet svědčí pro dysbiózu, příliš mnoho – bakteriální vaginózu).

Obsah leukocytů by měl být minimální – ne více než:

• 0-1 v zorném poli – močová trubice;

• 1-5 v zorném poli – cervikální kanál;
• 10-15 v zorném poli – pochva.

Zvýšený obsah leukocytů ve vzorku ukazuje na přítomnost zánětlivého procesu.

Detekce gramnegativních diplokoků v testovaném vzorku poskytuje základ pro diagnózu kapavky.

Clue (atypické) buňky jsou epiteliální buňky obklopené bakteriemi (nejčastěji gardnerella). Pokud jsou přítomny, je důvod mluvit o bakteriální vaginóze.

Detekce červených krvinek v materiálu může indikovat děložní krvácení, erozi nebo nádor.

Pokud jsou trichomonády detekovány v nativním (nezbarveném) nátěru, je to známka trichomoniázy, infekčního parazitárního onemocnění přenášeného sexuálně.

Přítomnost plísňových prvků ve velmi malých množstvích není abnormalitou. Pokud je v nátěru pozorována jejich aktivní reprodukce, znamená to kandidózu (drozd).

V rámci testu je každý z ukazatelů stanoven samostatně pro každou lokalizaci genitourinárního systému.

Mužčiny

Stěr z močové trubice (močového kanálu) se vyšetřuje především pro zjištění zánětlivého procesu u onemocnění jako je negonokoková uretritida, trichomoniáza, chlamydie, syfilis, kapavka. Test umožňuje včasné odhalení infekce, což umožňuje rychleji zahájit léčbu a vyhnout se komplikacím. Studie nám navíc umožňuje odlišit patologický výtok z močové trubice od nepatologických.

V mikroflóře močové trubice mužů převažuje epidermální stafylokok produkující látky, které potlačují rozvoj patogenních mikroorganismů. Kromě toho může obsahovat malá množství alfa-hemolytických streptokoků (hlavně viridans), korynebakterie a Ureaplasma urealyticum. Studie také prokázaly možnost přítomnosti zástupců přechodné mikroflóry, kteří se dostali do močové trubice ze sliznic konečníku nebo z kůže – mykobakterie smegma a fusobakterie, oportunní mikroorganismy (E. coli, Proteus, Staphylococcus aureus, Corynebacteria, Klebsiella , Gardnerella, anaeroby, kvasinkám podobné houby rodu Candida).

Normálně jsou horní části močové trubice sterilní. Posun v rovnováze lze pozorovat v případě metabolických poruch, nedodržování pravidel osobní hygieny nebo při užívání širokospektrých antibakteriálních léků.

Stěr z mužské močové trubice může odhalit:

• dlaždicové epiteliální buňky (vrstva vystýlající vnitřní povrch močové trubice; její přítomnost je normální, její nepřítomnost svědčí pro buněčnou atrofii);
• leukocyty (jejich obsah je obvykle velmi nízký, během zánětlivého procesu se jejich počet prudce zvyšuje a může dosáhnout úrovně „pokrytí celého zorného pole“);
• tyčinky (jsou normální mikroflórou; jiné bakterie by normálně neměly chybět);
• kvasinkové houby (jejich přítomnost ukazuje na přítomnost drozdů; u latentní formy onemocnění se v nátěru nacházejí spory hub);
• trichomonády (jednoduché jednobuněčné pohyblivé mikroorganismy s bičíkem, které jsou původcem zánětlivých onemocnění urogenitálního systému);
• Diplokoky (gonokoky) jsou původci kapavky a normálně by neměly chybět.

Pokud jsou při 1000násobném zvětšení a zobrazení alespoň 5 zorných polí detekovány v zorném poli více než 4 polymorfonukleární leukocyty, jedná se o známku uretritidy (zánětu močové trubice). Chronická uretritida je charakterizována zvýšením hladiny lymfocytů a zvýšením počtu epiteliálních buněk.

Kapavka je charakterizována počtem bílých krvinek 10 nebo vyšším v zorném poli. Přítomnost gramnegativních diplokoků (zejména pokud jsou lokalizovány uvnitř buněk) v kombinaci s vysokou hladinou leukocytů a nízkým počtem nebo úplnou absencí zástupců normální mikroflóry může také naznačovat přítomnost onemocnění.

Při současném zvýšení hladiny leukocytů, erytrocytů a epiteliálních buněk lze předpokládat přítomnost traumatu nebo nádoru močové trubice, vředy na její sliznici, krystalurii (zvýšený obsah zbytků krystalických solí biologicky aktivních kyselin v moči, což je počáteční stadium urolitiázy) atd.

Přítomnost atypických epiteliálních buněk v nátěru může být indikátorem novotvarů v močové trubici v případě kandidózy pseudomycelium (nepravé kvasinkové mycelium, jehož hyfy jsou složeny z buněk vzniklých pučením, nikoli dělením, jako např. pravé mycelium hub) je detekováno v nátěru v případě trichomoniázy jsou detekovány trichomonády;

Speciální sondou se odebírají stěry, které se následně nanesou na sklo a vysuší, načež se vyšetřují v laboratoři. Vlastnost měnit nebo neměnit barvu při použití speciálního léku umožňuje posoudit složení sekretu z urogenitálního traktu.

Získání správného výsledku výzkumu závisí na správném výběru materiálu. Jednou z hlavních podmínek je použití sterilních jednorázových nástrojů pro výkon, určených pro každý jednotlivý typ vyšetření.

Nedoporučuje se provádět testování při užívání antifungálních nebo antibakteriálních léků nebo používání jakýchkoli antiseptik, protože to může zkreslit výsledky testu.

Požadavky na výběr materiálu

Nedoporučuje se odebírat nátěry a vzorky pro PCR testování najednou, protože to ovlivňuje kvalitu zvoleného materiálu. Není-li z důvodu vyšší moci možné přeplánovat odběr vzorku pro výzkum na jiné dny, postupuje se podle určité sekvence testů: kultivace (mikrobiologický výzkum), nátěr (bakterioskopie), polymerázová řetězová reakce (PCR)/cytologie (buňka výzkum).

Ženщины

U žen v reprodukčním věku by se stěry měly provádět nejdříve 5. den menstruačního cyklu a nejpozději 5 dní před začátkem menstruace.

Den před odběrem vzorku se musíte zdržet:

• z intimity;
• z vaginálního výplachu;
• od zavádění čípků a jiných léků do pochvy.

Mužčiny

Močová trubice se promyje močí, v důsledku čehož se z ní vymyjí leukocyty a mikroorganismy. Pro získání správného výsledku je třeba vzorek odebrat ráno před močením, po noční abstinenci moči (od posledního močení musí před odběrem stěru uplynout alespoň 4-5 hodin).

Vyšetření žen se provádí:

a) při preventivních prohlídkách a podle jejich indikací;

b) při příznacích dysbiózy nebo zánětu urogenitálního traktu v důsledku užívání antibiotik, nedodržování diety, nošení syntetického spodního prádla, používání denních hygienických vložek apod.;

c) za účelem posouzení složení mikroflóry urogenitálního systému;

d) pro účely diagnostiky bakteriální vaginózy;

e) za účelem diagnostiky některých pohlavně přenosných infekčních chorob;

f) pro účely diferenciální diagnostiky mezi patologickými stavy reprodukčního a močového systému;

g) před gynekologickými zákroky:

• ukončení těhotenství;
• operace dělohy;
• operace na přílohách;
• diagnostická kyretáž děložní dutiny nebo cervikálního kanálu;
• hysteroskopie (vyšetření vnitřní dutiny dělohy pomocí hysteroskopu, který umožňuje nejen diagnostiku, ale i minimálně invazivní chirurgické operace);

h) při komplexních vyšetřeních v těhotenství:

• při registraci;
• ve 30 týdnech;
• ve 37 týdnech;

i) když se objeví výtok z genitálního traktu, který není charakteristický pro zdravý stav;

j) jako doplňkový test ke kulturám na anaerobní infekci.

Vyšetření mužů se provádí:

a) při preventivních prohlídkách a podle jejich indikací;

b) ke stanovení složení uretrální mikroflóry;

c) za účelem diagnostiky sexuálně přenosných infekcí (kapavka, trichomoniáza) za přítomnosti bolesti při močení, výtoku z močové trubice;

d) pro účely diferenciálního stanovení charakteru výtoku z močové trubice (patologického nebo fyzického);

e) pro účely diagnostiky uretritidy;

f) v případě neplodnosti;

g) při přípravě na mimotělní oplodnění (metoda asistovaného početí používaná v případech neplodnosti).

Při zkoumání nátěru věnuje odborník pozornost následujícím detailům:

• jsou v něm epiteliální buňky a jaký typ jsou;
• zda vzorek obsahuje produkty rozpadu tkáně (buněčný detritus) a hlen;
• jaký počet leukocytů je určen v jednom zorném poli;
• jaké morfologické typy bakterií jsou přítomny a v jakých relativních množstvích, jak reagují na Gramovo barvení.

V nátěrech mohou být přítomny následující typy bakterií:

• gramnegativní a grampozitivní koky, spojené do párů, skupin nebo řetězců, umístěné uvnitř nebo vně buněk;
• gramnegativní bakterie ze skupiny coli;
• laktomorfotypy – různé laktobacily, zástupci vaginální mikroflóry, regulující aktivitu patogenních a oportunních bakterií;
• morfotypy difteroidů (bakterie podobné difterickým bacilům) nebo korynebakterie;
• morfotypy anaerobních bakterií (tedy těch, které si vystačí s minimem kyslíku) – mobiluncus, peptostreptokoky, fusobakterie, bacteroides.

Mikroskopický obraz nátěrů je interpretován s ohledem na:

• celkové množství biomateriálu na skle;
• stav epitelu, přítomnost klíčových buněk.

Reakce leukocytů se hodnotí podle počtu jednotek v zorném poli a interpretuje se takto:

• nepřítomnost leukocytů;
• malé množství – až 10 jednotek v zorném poli;
• mírné množství – 10-15 jednotek v zorném poli;
• velké množství – 30-50 jednotek v zorném poli.

Vysoký nebo střední počet leukocytů je indikátorem přítomnosti zánětu.

Množství mikroflóry se odhaduje takto:

• skrovné – až 10 jednotek. v zorném poli (+);
• střední – 11-100 jednotek. v zorném poli (++);
• významné – 100-1000 jednotek. v zorném poli (+++);
• masivní – více než 1000 jednotek. v zorném poli (++++).

Výsev se doporučuje v následujících případech:

• pokud je přítomna velká nebo střední leukocytární reakce a v nátěru chybí mikroby (minimální limit pro detekci mikroorganismů při mikroskopickém vyšetření neklesá pod 100 000 CFU/ml a oportunní mikrobi mohou vykazovat patogenní potenciál v počtu 10 000–100 000 jednotky na mililitr);
• při detekci oportunních mikroorganismů i v jednotlivých množstvích v zorném poli (v tomto případě je účelem kultivace určit rod a typ mikrobů, jejich citlivost na antibiotika a poskytnout kvantitativní hodnocení k určení jejich schopnosti vyvolat onemocnění );
• pro samostatné stanovení zástupců jednoho morfotypu – laktobacily, klostridie, propionobakterie, eubakterie aj.;
• určit typ hub a jejich citlivost na antimykotika;
• u bakteriální vaginózy v kombinaci s nespecifickým zánětlivým procesem charakterizovaným znatelným zvýšením hladiny leukocytů.

Nedoporučuje se ani nutné zasévat:

• u bakteriální vaginózy neprovázené přítomností oportunních mikroorganismů;
• s cytolytickou vaginózou („nemoc čistoty“) – nezánětlivé onemocnění charakterizované sníženou kyselostí v pochvě a v důsledku toho přítomností výtoku připomínajícího soor (vyskytují se v důsledku nadbytku laktobacilů u žen, které se rády myjí nadměrně a především sprchovat – odtud neoficiální název nemoci);
• se střední formou mikroflóry ve vagíně;
• pro vaginální atrofii (vaginální suchost).

Výsledek testu je vydán na formuláři laboratoře lékařské společnosti „Nauka“. Příklad této analýzy je uveden níže:

CELÉ JMÉNO.: Ivanova Inna Petrovna Pohlaví: ж Datum narození: xx.xx.xxxx

Datum výzkumu: xx.xx.xxxx

Výzkum

Výsledek

Normy interpretace

Poznámka

[704] Bakterioskopie nátěru

Datum vydání (datum studia): xx.xx.xxxx