LDH v krvi (laktátdehydrogenáza): co to je, normy, důvody pro zvýšení nebo snížení

Krevní test na koncentraci laktátdehydrogenázy (LDH) 1+2 frakce – důležité laboratorní vyšetření, které umožňuje spolehlivé stanovení poškození myokardu a identifikaci řady dalších patologických stavů organismu, sloužící mimo jiné k jejich pozdní diagnostice. Studie se provádí za účelem diagnostiky poškození myokardu (především infarktu), dalších srdečních patologií, různých typů anémie, nekrotických změn v ledvinové tkáni, plicní embolie a nádorů pohlavních žláz. Analýza nám umožňuje určit povahu patologického poškození a jeho rozsah.

Laktátdehydrogenáza je důležitý enzym glykolýzy, nezbytný pro normální proces oxidace laktátu na pyruvát. Je přítomen ve tkáních většiny hlavních orgánů a nachází se v játrech, slezině, ledvinách, plicích, myokardu, lymfatických uzlinách a v krevních buňkách, jako jsou krevní destičky, leukocyty a erytrocyty.

Zvýšení hladiny laktátdehydrogenázy v krvi ukazuje na porušení integrity buněk výše uvedených orgánů. Bylo zjištěno, že aktivita LDH v tkáních je přibližně 500krát vyšší než aktivita LDH v krvi. V tomto ohledu i při malém poškození tkáně dochází k významnému zvýšení laktátdehydrogenázy v krevním séru, což má důležitou diagnostickou hodnotu. Díky této vlastnosti je LDH považován za vysoce citlivý marker. Protože se však celková laktátdehydrogenáza nachází ve většině tkání lidského těla, nelze ji považovat za specifický marker. Zatímco jednotlivé izoformy (izoenzymy) LDH mají mnohem větší specificitu. Existuje celkem 5 izoforem laktátdehydrogenázy.

Nadbytek 1 a 2 izoenzymů laktátdehydrogenázy je nejtypičtější pro léze srdečního svalu, sleziny, ledvinové tkáně, ale i krevních buněk – erytrocytů a leukocytů. V praktické klinické činnosti je tento indikátor využíván především pro účely diagnostiky srdečních patologií a především infarktu myokardu. To je vysvětleno skutečností, že po infarktu myokardu dochází během 1-2 dnů ke zvýšení enzymatické aktivity celkové laktátdehydrogenázy a jejího 1-izoenzymu, která dosahuje svých maximálních hodnot za 2-3 dny. Tyto indikátory si udrží své vysoké hodnoty dalších 5-10 dní, a proto je lze použít pro účely pozdní diagnózy „infarktu“.

Důležité je také stanovení poměru koncentrací 1 a 2 izoenzymů laktátdehydrogenázy. Aktivita laktátdehydrogenázy-2 by normálně měla převyšovat aktivitu laktátdehydrogenázy-1. Při infarktu myokardu však dochází k opačnému obrazu, kdy je pozorováno prudké zvýšení aktivity LDH-1 na pozadí stabilní nebo mírně zvýšené aktivity LDH-2. Tento jev se nazývá křížení izoenzymu laktátdehydrogenázy. Tento jev je charakteristický pro infarkt myokardu, přičemž normální poměr indikovaných izoenzymů tuto diagnózu vyvrací.

Nejen infarkt myokardu, ale i řada dalších procesů probíhajících při poškození myokardu mají za následek odchylky od normálních hladin LDH-1 a LDH-2. Zejména je to pozorováno v případech ischemické choroby srdeční, dehydratace, dlouhodobého hladovění, vystavení virům, toxickým složkám, chemickým faktorům, užívání některých léků a intenzivní fyzické aktivitě.

Kdy je předepsán test frakce LDH 1+2 (HBDH)?

Krevní test na frakce LDH 1+2 předepisuje kardiolog, praktický lékař nebo terapeut. Vhodnost provádění výzkumu nastává v následujících případech:

• pokud existuje podezření na infarkt myokardu, jiné srdeční patologie, stejně jako pro sledování výše uvedených onemocnění;
• při předepisování terapie založené na kardiotoxických lécích;
• ke sledování pacientů během jejich průběhu cytostatické chemoterapie.
• pokud existuje podezření na onkologii gonád;
• odhalit anémii různého původu;
• pro diagnostiku renálních patologií.

Jak se správně připravit na studium?

Biologickým materiálem podléhajícím laboratorní diagnostice je žilní krev. Odběr krve provádí odborný lékař za přísného dodržování aseptických a antiseptických předpisů. Specialista provede venepunkci a odebere 5 ml žilní krve. Aby se snížila pravděpodobnost získání nespolehlivých výsledků, měl by se pacient připravit na nadcházející studii. Za tímto účelem se doporučuje dodržovat řadu důležitých doporučení:

• krev je nutné darovat v první polovině dne, nejoptimálnější časový úsek je od 8 do 11 hodin;
• odběr biologického materiálu se provádí přísně na lačný žaludek. Od posledního jídla musí uplynout alespoň 8 hodin. V den procedury můžete pít pouze neperlivou vodu, a proto jsou zakázány potravinářské výrobky;
• dva dny před testem byste neměli jíst tučná jídla. Pokud tento požadavek není splněn, je vysoká pravděpodobnost, že vzorek krve kontaminovaný tukovými částicemi nebude vhodný pro laboratorní vyšetření. Platí také přísný zákaz požívání alkoholu;
• V předvečer vyšetření je nutné minimalizovat fyzickou aktivitu a vyhýbat se stresovým situacím, depresivním stavům a jakýmkoli emocionálním výlevům;
• Nekuřte hodinu před procedurou;
• Před odběrem krve musíte 10 minut tiše sedět před kanceláří, zaujmout pohodlnou pozici a co nejvíce se uvolnit. To pomůže normalizovat dýchání, puls a srdeční rytmus;
• Pokud užíváte léky, měli byste o tom informovat svého lékaře. Specialista posoudí možný vliv medikace na výsledky testů a v případě potřeby rozhodne o přerušení terapie.

Metoda výzkumu

Rozbor krve se provádí pomocí chemických výzkumných metod, elektroforézy a chromatografických metod. Porovnání koncentrace izoforem LDH 1 a 2 umožňuje lokalizaci poškozeného orgánu. Analýza je charakterizována získáním elektroforetického obrazu, kterého je dosaženo separací proteinové směsi pomocí elektroforézy. Jednotlivé proteiny pod vlivem elektrického proudu procházejí speciální membránou různou rychlostí a vytvářejí pásy charakteristické pro tento proces.

Co znamenají výsledky analýzy frakce LDH 1+2 (HBDH)?

Normální hodnoty pro LDH-1 a LDH-2 jsou považovány za mezi 90 a 180 IU/L. U mužů je oproti ženám obvykle koncentrace LDH vyšší a jde o normální variantu. Odchylky od referenčních hodnot směrem ke zvýšení naznačují vývoj patologického procesu. Důvody pro zvýšení 1 a 2 izoenzymů laktátdehydrogenázy jsou:

• infarkt a další poškození myokardu;
• poškození sleziny;
• akutní nekrotické změny v renální tkáni;
• poškození lymfatických uzlin;
• hemolytické a jiné typy anémie;
• hemolýza;
• nádory pohlavních žláz

Snížené hladiny LDH-1 a LDH-2 nejsou patologické. Tento výsledek ukazuje:

• spontánní normalizace stavu pacienta;
• úspěšně ukončenou terapii.

Výsledky analýzy může interpretovat pouze lékař. Výsledky nelze posuzovat izolovaně a slouží jako jediný základ pro stanovení konečné diagnózy a předepsání požadované terapie. Měly by být posuzovány ve spojení s dalšími významnými anamnestickými údaji, výsledky instrumentálních a laboratorních studií.

Co může ovlivnit výsledek?

Výsledky testu může ovlivnit řada faktorů, včetně:

• trvání poškození;
• povaha poškození a jeho rozsah (rozsáhlý infarkt nebo mikroinfarkt);
• užívání určitých léků (např. anestetika, aspirin);
• přítomnost doprovodných patologií;
• vysoká fyzická aktivita (například maratonský běh);
• dlouhé období půstu;
• dehydratace organismu.

Laktátdehydrogenáza (LDH) je enzym zapojený do metabolismu glukózy. LDH katalyzuje reverzibilní reakci přeměny pyruvátu na laktát, který uvolňuje NAD+ (nezbytný pro udržení procesu glykolýzy). LDH je tetramer, který se skládá ze dvou typů podjednotek: LDH A a LDH B. LDH A je také známá jako podjednotka M, protože se nachází převážně v kosterním svalu (M). LDH B (neboli podjednotka H) se nachází v srdečním svalu (H – heart).

Na základě různé pohyblivosti během elektroforézy se rozlišuje pět hlavních izoforem LDH: LDH-1 (4H), LDH-2 (3H, 1M), LDH-3 (2H, 2M), LDH-4 (1H, 3M) a LDH- 5 (5M). Tyto izoformy, ve kterých převažuje podjednotka A, katalyzují reakci přeměny pyruvátu na laktát. A izoformy s převažujícím obsahem podjednotky B – reakce přeměny laktátu na pyruvát.

U infarktu myokardu, myokarditidy, kardiovaskulárních intervencí a u krevních chorob doprovázených hemolýzou (např. u megaloblastické anémie) je spravedlivé očekávat zvýšení LDH-1 a LDH-2. Obsah LDH-2, LDH-3 a LDH-4 se zvyšuje u onemocnění ledvin a patologií kosterního svalstva. U onemocnění jater a myopatií se LDH-4 a LDH-5 zvyšují.

LDH nelze použít jako specifický marker onkopatologií. Řada studií však prokázala prognostický význam LDH v léčbě některých onkologických onemocnění. Stanovení LDH hraje například důležitou roli v léčbě různých typů karcinomů a rakoviny prsu. Sérová LDH je obvykle zvýšena u Hodgkinova lymfomu, non-Hodgkinova lymfomu a mnohočetného myelomu. Stanovení LDH v krevním séru může být také užitečné pro hodnocení účinnosti protinádorové terapie u určitých typů rakoviny (kolorektální karcinom, malobuněčný a nemalobuněčný karcinom plic atd.). Distribuce izoforem LDH závisí na typu patologie. U mnoha typů rakoviny převládají izoformy LDH-4 a LDH-5 (nádory štítné žlázy, kolorektální karcinom, nádory prsu, plicní nádory, ledviny, nádory centrálního nervového systému). U lymfomů však mohou být LDH-2, LDH-3 a LDH-4 zvýšené. A v případě nádorů ze zárodečných buněk převažuje LDH-1.

V klinické laboratorní praxi se pro stanovení LDH používají dva typy spektrofotometrických metod:
1. Metoda založená na doporučení IFCC (Mezinárodní federace klinické chemie):
LDH katalyzuje oxidaci laktátu na pyruvát, čímž vzniká NADH. Nárůst optické hustoty se zaznamenává při vlnové délce 340 nm a je přímo úměrný aktivitě enzymu ve vzorku.
2. Metoda založená na doporučeních SCE (Scandinavian Committee on Enzymes):
LDH katalyzuje redukci pyruvátu na laktát. Tato reakce je doprovázena oxidací NADH na NAD+. Snížení absorbance v důsledku použití NADH se měří při 340 nm a je přímo úměrné aktivitě enzymu ve vzorku.

Zajímavou srovnávací studii metod stanovení LDH v krevním séru provedla skupina ruských vědců z Federálního státního rozpočtového ústavu „Národní centrum lékařského výzkumu hematologie“ Ministerstva zdravotnictví Ruska. U 40 primárních pacientů s hemoblastózou a 10 zdravých jedinců byla aktivita LDH v krevním séru stanovena pomocí dvou metod od stejného výrobce: pyruvát na laktát (přímá, LDHp) a laktát na pyruvát (reverzní reakce, LDHl) na automatickém biochemickém analyzátoru. Průměrná aktivita LDHp i LDHl byla ve skupině pacientů zvýšena (ve srovnání se skupinou zdravých dárců). Byly stanoveny korelační koeficienty mezi oběma metodami: 0,958 pro skupinu zdravých osob a 0,999 pro skupinu pacientů. Autoři se domnívají, že mezi oběma metodami stanovení LDH byla vysoká míra korelace, lze je tedy považovat za ekvivalentní. Pro dynamické monitorování se však doporučuje použít jednu metodu [Srovnávací analýza metod pro studium aktivity laktátdehydrogenázy u pacientů s hemoblastózou].

Znalecký posudek:
Je známo, že nárůst nádorových buněk je doprovázen zvýšením aktivity celkové LDH a může také vést ke změně poměru jejích izoforem. Bohužel LDH nelze použít jako specifický marker pro diagnostiku rakoviny. U některých typů rakoviny však může být LDH použita jako pomocný nástroj pro sledování progrese onemocnění a hodnocení účinnosti protinádorové terapie.

Panasenko M.N., Karpova I.V., Efimkina Ya.A., Dvirnyk V.N. Srovnávací analýza metod pro studium aktivity laktátdehydrogenázy u pacientů s hemoblastózami. Hematologie a transfuziologie, roč. 65, č. S1, str. 196–197, 2020