Krevní test na ANF: co to je, dekódování, jaká data ukazuje

Antinukleární faktor na buňkách HEp-2, IgG – laboratorní test, který umožňuje detekovat antinukleární protilátky proti jádrům tělu vlastních buněk, které jsou markerem systémových patologií pojivové tkáně. Tato analýza je vysoce citlivá a je považována za „zlatý standard“ v diagnostice autoimunitních onemocnění.

Imunoglobuliny nebo protilátky jsou nezbytné k ochraně těla před cizími látkami. Jsou syntetizovány plazmatickými buňkami. Existuje několik tříd imunoglobulinů (A, G, D, E a M), které se liší strukturou a funkcemi.

Studijní charakteristiky:

• Typ biomateriálu: venózní krev
• Synonyma (rus): antinukleární protilátky (ANA), ANF, antinukleární protilátky.
• Synonyma (eng): Fluorescent AntiNuclear Antibody detection (FANA), ANA-Hep2, antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrát.
• Metoda výzkumu: Nepřímá imunofluorescenční reakce.
• Doba realizace: 10 dní

Imunoglobuliny IgG – nejpočetnější skupina protilátek, které jsou produkovány B-lymfocyty při opakovaném kontaktu s antigenem nebo autoantigeny, což mohou být buňky a tkáně těla částečně cizí vlivem různých poškozujících faktorů, infekcí a také např. v důsledku poruch imunitního systému.

U autoimunitních patologií jsou produkovány autoprotilátky, které jsou namířeny proti tělu vlastním tkáním a buňkám. Navzdory skutečnosti, že mechanismy vývoje takových onemocnění nejsou přesně známy, byla identifikována řada faktorů, které zvyšují riziko jejich rozvoje. Nejvýznamnější z nich je genetická predispozice.

Antinukleární faktor je celá skupina autoprotilátek proti složkám buněčného jádra (RNA, DNA, histonové proteiny), proto se tyto imunoglobuliny nazývají antinukleární a jejich skupina, která zahrnuje asi 200 odrůd, se nazývá faktor. Takové autoprotilátky interagují s různými strukturami jádra, což se klinicky projevuje zánětlivými procesy ve tkáních, bolestmi kloubů a svalů, zvýšenou únavou, hubnutím a změnami na kůži.

Indikace pro analýzu

Analýza se provádí jako součást diagnostiky systémových patologií pojivové tkáně, pokud:

• pacient má potíže (dlouhodobá subfebrilní teplota, artralgie, ztráta hmotnosti, změny stavu kůže);
• jsou charakteristické změny v klinických a biochemických krevních testech (zvýšené ESR, zvýšené hladiny C-reaktivního proteinu, přítomnost imunitních komplexů).

Díky této studii lze mít podezření:

• systémový lupus erythematodes;
• Sjögrenův syndrom;
• системную склеродермию;
• zánětlivá myopatie (polymyositida, dermatomyositida);
• antifosfolipidový syndrom;
• smíšené onemocnění pojivové tkáně.

Kromě toho je tato analýza nezbytná pro:

• posouzení účinnosti léčby;
• diferenciální diagnostika revmatických onemocnění;
• sledování progrese systémových patologií.

Vyšetření nemá žádné kontraindikace.

Jak se připravit na analýzu

Krev na analýzu se podává ráno nalačno. Poslední jídlo by mělo být nejpozději 8 hodin před testem. Večeře by měla být lehká, bez tučných nebo smažených jídel. Během XNUMX hodin před testem je zakázáno požívat alkoholické nápoje. Ráno před testem nesmíte nic jíst ani pít kromě čisté neperlivé vody. Nedoporučuje se ani kouřit.

Nemůžete darovat krev po fyzikální terapii, masáži nebo jakýchkoli instrumentálních diagnostických procedurách. Pokud pacient užívá nějaké léky, je nutné o tom informovat lékaře a rozhodnout o jejich dočasném zrušení.

Metodologie analýzy

Pro studii je vyžadováno sérum z žilní krve. Analýza využívá speciální kulturu buněk HEp-2 získaných z adenokarcinomu (maligního nádoru) lidského hrtanu. Tyto rakovinné buňky mají velké jádro, které je snadno viditelné pod mikroskopem a rostou v jediné vrstvě. Jsou fixovány na sklo a inkubovány s naředěným krevním sérem od pacienta. Po odstranění přebytku je dále pěstují protilátkami značenými fluoresceinem, poté se promyjí a výsledný vzorek se zkoumá pod mikroskopem.

Test se provádí pomocí technologie nepřímé imunofluorescence ke stanovení titru protilátek a hlavních typů jaderné luminiscence, které charakterizují přítomnost určitých typů protilátek v testovaném vzorku, které jsou charakteristické pro konkrétní autoimunitní patologii.

Interpretace výsledku analýzy

Podle mezinárodních doporučení je titr protilátek vyšší než 1:160 považován za diagnosticky významný. Proto je při referenčních hodnotách titr menší než 1:160.

Při exacerbaci autoimunitních patologií titr přesahuje 1:640 a během dočasného klidu v nemoci klesá na 1:160-1:320.

Zvýšené hladiny antinukleárního faktoru může být, když:

• diskoidní lupus;
• systémový lupus erythematodes;
• lupus vyvolaný léky;
• Sjogrenův syndrom;
• Sharpův syndrom;
• Raynaudův syndrom;
• systémová sklerodermie;
• chronická autoimunitní hepatitida;
• dermatomyositida nebo polymyositida;
• primární biliární cirhóza jater;
• těžká myastenie;
• revmatoidní artritida;
• systémová nekrotizující vaskulitida.

Navíc se antinukleární faktor může zvýšit u onemocnění nerevmatického původu:

• infekční mononukleóza;
• leukémie a další maligní procesy;
• endokarditida infekčního původu;
• tuberkulóza;
• pneumokonióza;
• endokrinní patologie, jako je diabetes mellitus, tyreotoxikóza, tyreoiditida, polyendokrinní syndrom;
• dermatologická onemocnění, jako je pemfigus a psoriáza;
• intersticiální plicní fibróza.

Někdy se protilátky zvyšují během těhotenství, stejně jako po transplantaci a během hemodialýzy.

Pomocí typu záře lze podezřívat konkrétní onemocnění, což usnadňuje identifikaci cílových buněčných struktur pro napadení antinukleárními tělísky a stanovení taktiky dalšího vyšetření.

• Homogenní (difúzní). Známka systémového lupus erythematodes, lupus vyvolaný léky. V tomto případě jsou v krvi detekovány protilátky proti DNA (jednovláknové a dvouvláknové), DNP a histony (chromozomální proteiny úzce spojené s DNA).
• periferní (okrajové). Typické pro systémový lupus erythematodes. Protilátky proti dvouvláknové nativní DNA (dsDNA) jsou detekovány v séru.
• Skvrnitý (síťový, zrnitý). Je nejběžnější, a proto je považován za nejméně specifický. Tento typ záře se vyskytuje u systémového lupus erythematodes, smíšených onemocnění pojivové tkáně, Sjogrenova syndromu, polymyozitidy a dermatomyozitidy. V krvi jsou detekovány protilátky Sm, RNP, SS-A/Ro, SS-B/La, Jo-1.
• Retikulovaná skvrnitá (cytoplazmatická). Označuje difuzní systémovou sklerodermii, polymyozitidu, dermatomyozitidu, autoimunitní hepatitidu a primární biliární cirhózu. V krvi cirkulují protilátky proti Scl-70 a tRNA syntetáze (zejména proti Jo-1).
• Diskrétní skvrnité (centromeric). Pomáhá diagnostikovat Raynaudův syndrom a CREST syndrom (jedna z forem systémové sklerodermie). V séru jsou detekovány anticentromerní protilátky.
• Nukleární (nukleární). Typické pro difuzní formu systémové sklerodermie, Sjogrenovu chorobu. V testovaném materiálu jsou detekovány protilátky proti RNA polymeráze 1, PM/Scl, U3RNP.

Negativní výsledek indikuje nepřítomnost antinukleárních protilátek. Není proto potřeba provádět hlubší studii s použitím testů, jako jsou antinukleární protilátky imunoblotem nebo enzymatická imunoanalýza se samostatnými antigeny, které jsou předepsány pro objasnění diagnózy.

V některých případech mohou být získány falešně negativní výsledky. To se týká určitých cytoplazmatických antigenů (například protilátky proti Jo-1 nebo ribozomálnímu P-proteinu mohou chybět).

Co může ovlivnit výsledek analýzy?

Falešně pozitivní údaje se vyskytují v následujících případech:

• věk pacienta je více než 60 let;
• užívání léků, které vyvolávají vývoj lupusu vyvolaného léky;

Při léčbě glukokortikoidy se objevují falešně negativní výsledky.

V každém případě získaná data interpretuje pouze lékař ve spojení s klinickým obrazem a dalšími laboratorními testy. Je však třeba vzít v úvahu, že pozitivní výsledek nemusí vždy znamenat autoimunitní patologii.