Jak odebrat krev z žíly u kojenců: pravidla pro odběr biomateriálu od dětí mladších jednoho roku
Venózní krev se odebírá ráno nalačno. Při odběru žilní krve je nutné vzít v úvahu řadu faktorů, které mohou ovlivnit výsledek hematologických studií: fyzický stres (běh, rychlá chůze, chození do schodů), emoční vzrušení, jídlo v předvečer testu, koupání, pití alkoholu atd. K odstranění těchto faktorů je třeba dodržovat následující podmínky pro přípravu pacientů:
• žilní krev je odebrána po 15minutovém odpočinku subjektu;
• pacient při odběru sedí u těžce nemocných, odběr krve lze provádět vleže;
• kouření, pití alkoholu a jídlo bezprostředně před studií jsou vyloučeny;
Hlavní metodou odběru žilní krve pro laboratorní vyšetření je punkce žíly. Venózní krev se obvykle odebírá z kubitální žíly. V případě potřeby jej lze získat z jakékoli žíly (zápěstí, hřbet ruky, nad palcem atd.). U novorozenců a kojenců se krev obvykle odebírá z čelní, temporální nebo jugulární žíly.
Při odběru krve z žíly je nutné se vyhnout: místům jizev, hematomů; žíly používané pro transfuzi roztoků; žíly na nohou (u pacientů s diabetem, s poruchami periferního průtoku krve, angiopatií).
Оборудование
Pro venepunkci lze použít tři typy punkčních systémů:
• jednorázové plastové systémy (vakutainery), sestávající z nádobky s našroubovanou jednorázovou jehlou a zkumavky s těsně přiléhající zátkou a vakuem uvnitř;
• jednorázové injekční stříkačky s vhodným průměrem jehly;
• jehly s vnitřním průměrem 0,55-0,65 mm.
Podmínky pro transport žilní krve
Řádně odebraná žilní krev musí být včas doručena do laboratoře. Při pokojové teplotě by doba dodání neměla přesáhnout 60 minut po odběru krve. Pokud je krev dodávána do laboratoře během dne, je uchovávána při teplotě +4C-+6C (v lednici) a následně dodávána do laboratoře ve speciálních transportních nádobách v ledové lázni.
Během přepravy musí být zkumavky a nádoby s krví dostatečně chráněny před škodlivými vlivy prostředí a povětrnostními vlivy. Při přepravě žilní krve je třeba přísně dodržovat bezpečnostní pravidla, asepse a antiseptika.
Zkumavky musí být označeny, zabaleny a těsně uzavřeny. Obal by měl být vhodný pro přepravu. Doba skladování závisí na studovaném indikátoru, skladovací teplotě a antikoagulantu použitém k odběru krve.
Způsob získání krevního séra (bez použití separačních nebo centrifugačních pomůcek)
Оборудование
1. Odstřeďte skleněné zkumavky o celkovém objemu 10-12 ml.
2. Skleněné tyčinky nebo Pasteurovy pipety s kapilárami utěsněnými na konci (k oddělení sraženiny).
3. Laboratorní odstředivka (až 3000 ot./min.).
Venózní krev získaná bez antikoagulancií do skleněné centrifugační zkumavky se v ní ponechá při pokojové teplotě (15-20C) po dobu 30 minut, dokud se úplně nevytvoří sraženina. Jakmile se sraženina vytvoří, zkumavky se otevřou a tenká skleněná tyčinka nebo utěsněná kapilární Pasteurova pipeta se opatrně vede podél vnitřních stěn zkumavky podél obvodu v horní vrstvě krve, aby se oddělil sloupec sraženiny od stěn zkumavky. trubice. Sérum se nalije do jiné centrifugační zkumavky, přičemž sraženina se přidržuje skleněnou tyčinkou, a centrifuguje se nebo centrifuguje ve stejných primárních zkumavkách.
Po stažení sraženiny se vzorky odstřeďují při RCF 1000 až 1200 xg (maximálně 1500 xg) po dobu 10 minut.
V případě použití mikrozkumavek a k nim centrifugy se centrifugace provádí při 6000-15000 xg po dobu 1,5 minuty. Po odstředění se sérum nalije do sekundárních (přepravních) zkumavek. Sérum by nemělo být hemolyzováno.
Plazma se získává z krve separací krvinek. Jde o bezbuněčný supernatant získaný centrifugací krve, jejíž srážení je inhibováno přidáním antikoagulantu ihned po odběru. Plazma obsahuje faktory srážení krve. Vzhledem k tomu, že plazma a sérum obsahují cca 93 % vody, na rozdíl od plné krve, která obsahuje cca 81 % vody, je koncentrace složek v plazmě o 12 % vyšší než v plné krvi. To může mít zásadní diagnostický význam při studiu aktivity, například LDH, která má vyšší koncentraci v krevním séru než v plazmě.
Komerční plazmové výrobní systémy jsou široce používány. Jsou to zkumavky nebo zařízení injekčního typu („vakutainery“) s vakuem uvnitř, obsahující různé antikoagulancia a/nebo inhibitory glykolýzy. Stejně jako u sérových zařízení jsou tyto zkumavky s plazmou dodávány v různých variantách obsahujících separační gely a polystyrenové granule pro rychlejší produkci plazmy, snadnější přepravu a skladování. Už obsahují antikoagulancia a značky, do kterých by se měla odebírat krev.
Způsob výroby plazmy
Žilní krev získaná s antikoagulantem ihned po odběru se promíchá převrácením uzavřených zkumavek s krví alespoň 5x. Míchání by mělo být prováděno bez třepání nebo pěnění. Doba mezi začátkem přikládání turniketu a smícháním krve s antikoagulantem by neměla přesáhnout 2 minuty.
Po ekvilibraci zkumavek s krví se centrifugují při RCF 1000-1200 xg, ale ne více než 1500 xg, po dobu 10-15 minut. Plazma je okamžitě odváděna do transportní centrifugy nebo chemické zkumavky. Zkumavka se uzavře víčkem.
Podmínky pro transport krevní plazmy
Správně získaná a odebraná krevní plazma musí být včas doručena do laboratoře. Při pokojové teplotě by doba dodání neměla přesáhnout 24 hodin. Pokud je plazma dodávána do laboratoře během dne, je skladována při teplotě +4. +8C (v lednici) a následně dodáno do laboratoře ve speciálních přepravních nádobách v ledové lázni. Pro delší skladování lze plazmu zmrazit na –25C.
Pravidla pro transport plazmy jsou stejná jako pro žilní krev.