Jak darovat krev na syfilis: diagnostika onemocnění (ELISA, RPGA)

Imobilizační reakce Treponema pallidum (RIBT). Povinnou podmínkou je před vyšetřením vyloučit pacientovo užívání antibiotik, která mají toxický účinek na bledé treponémy a způsobují jejich nespecifickou imobilizaci.

Pozitivní výsledky RIBT jsou detekovány přibližně od poloviny sekundárního čerstvého období syfilis a mohou přetrvávat dlouhou dobu po léčbě. V případě potřeby se metoda používá k detekci AT v CSF, tato studie se vyznačuje vysokou specificitou, ale nízkou senzitivitou (asi 40 %).

RIBT je málo užitečný pro diagnostiku časných forem syfilis kvůli pozdnímu (ne dříve než 8–9 týdnů od okamžiku infekce) výskytu AT-imobilizinů; Metoda může poskytnout falešně pozitivní výsledky, zejména u pacientů s autoimunitní patologií, maligními chorobami a diabetem. RIBT je navíc poměrně složitá, pracná a nákladná analýza, která vyžaduje vysoce kvalifikovaný personál a přítomnost vivária, a proto se v posledních letech používá pouze v některých laboratořích. V diagnostice se RIBT využívá jako rozhodčí reakce v případě nesrovnalostí ve výsledcích jiných sérologických studií, k odlišení falešně pozitivních výsledků a ke stanovení diagnózy pozdních forem syfilis.

Komplement fixační test s treponemálním antigenem (CFT s TA)Senzitivita metody je asi 80 %, specificita 98 ​​%. Metoda byla součástí souboru standardních sérologických reakcí na syfilis, upravených nařízením Ministerstva zdravotnictví SSSR č. 1161 ze dne 02.09.1985. XNUMX. XNUMX „O zlepšení sérologické diagnostiky syfilis“. V současné době je použití této reakce, stejně jako CSC s kardiolipinovým antigenem, omezeno na jednotlivé laboratoře.

Imunofluorescenční reakce (IF). Pro diagnostiku syfilis se používá několik modifikací RIF: RIF-c – pro průkaz AT v CSF, RIF-200 (testovací sérum se před reakcí ředí 200x); RIF-abs (RIF s absorpcí), IgM-RIF-abs (pro stanovení IgM protilátek). Pokud jde o citlivost a specificitu, RIF-ABS není horší než RIBT, ale tato metoda je mnohem jednodušší na provedení. Výsledky RIF-ABS se stávají pozitivními od 3. týdne po infekci (před objevením se tvrdého sněhu nebo současně s ním), jedná se o metodu pro časnou diagnostiku syfilis. Pozitivní výsledky testů jsou často získány mnoho let po úplné léčbě časné syfilis a u pacientů s pozdní syfilis – po celá desetiletí.

Indikace pro provádění RIF-ABS:

• pozitivní výsledky NTT u těhotných žen při absenci klinických a anamnestických údajů indikujících syfilis;
• vyšetření jedinců s různými somatickými a infekčními onemocněními, u kterých jsou zaznamenány pozitivní výsledky NTT;
• vyšetření jedinců s klinickými projevy charakteristickými pro syfilis, ale s negativními výsledky NTT;
• včasná diagnóza syfilis;
• v některých případech – jako kritérium úspěšnosti antisyfilitické léčby: přechod pozitivního RIF-ABS na negativní po léčbě je 100% kritériem pro vyléčení syfilis.

IgM-RIF-abs se používá pro samostatnou detekci AT tříd Ig, což je zvláště zajímavé v diagnostice vrozené syfilis, kdy AT až treponema, syntetizované v těle dítěte, jsou reprezentovány IgM a AT IgG jsou mateřské původ. Indikace pro tuto studii jsou: diagnóza vrozené syfilis; Hodnocení výsledků léčby časné syfilis.

RIF má vysokou senzitivitu (98,5 %) a specificitu (99,6 %) pro téměř všechny formy syfilis. Nevýhody RIF jsou: nemožnost automatizace výzkumu a zaznamenávání výsledků; potíže s přípravou vysoce kvalitního antigenu ze suspenze bledých treponem získaných z varlat infikovaného králíka; subjektivita při hodnocení výsledků.

Pasivní hemaglutinační test (PHA). Srovnání výsledků získaných pomocí RPGA a RIBT, RIF-abs, KSR, MRP ukázalo vysokou senzitivitu a specificitu RPGA v diagnostice syfilis, shodující se s výsledky RIF-abs.

RPGA lze provádět v kvalitativních i kvantitativních verzích, existují makro- a mikro-modifikace. Kvantitativní metoda RPGA umožňuje vyhodnotit koncentraci specifických protilátek proti treponemu v krvi. Titry 1:640 a nižší jsou typické pro pacienty léčené v minulosti pro syfilis. Vyšší titry obvykle ukazují na aktivní, neléčenou infekci.

Pozitivní výsledky RPGA jsou obvykle zaznamenány 3 týdny po objevení se tvrdého chancre a poté u pacientů, kteří mají syfilis po mnoho let, často po celý život.

Senzitivita RPGA je 76 % pro primární syfilis; 100 % pro sekundární syfilis; 97 % pro latentní syfilis; 94 % u pozdní syfilis. Specificita RPGA je vyšší než specificita RIF-ABS, dosahuje 99 %.

Vzhledem k poměru vysoké specificity, senzitivity, snadnosti implementace, standardizace reagencií mezi treponemálními testy pro sérodiagnostiku syfilis zaujímá RPGA trvale přední místo v klinické praxi ve světě.

Speciální výhody ELISA jsou: vysoká citlivost a specificita metody; automatizace nastavení reakce; vysoký stupeň standardizace; schopnost studovat velké množství vzorků séra; v kvantitativním účetnictví a objektivní dokumentaci získaných výsledků; možnost současného stanovení titru antitreponemálních protilátek různých tříd (IgG a IgM) v jednom vzorku; vhodnost pro včasnou diagnostiku syfilis a diagnostiku vrozené syfilis; snadné použití pro krevní testy v transfuzní službě; použitelnost jako konfirmační specifický treponemový test. Senzitivita ELISA je 98–100 %, specificita 96–100 %.

Mezi nevýhody ELISA patří: nevhodnost pro studium jednotlivých vzorků; delší dobu před obdržením výsledku a kratší životnost souprav ELISA, například ve srovnání s RPGA.

Imunitní blot (IB). Jednou z moderních metod diagnostiky syfilis je IB pro stanovení IgG nebo IgM protilátek proti některým AG světlého treponemu.

Metoda má vysokou senzitivitu (až 100 %), specificitu (98 %) a reprodukovatelnost (100 %). Studie umožňuje studovat spektrum protilátek proti několika antigenům T.pallidum najednou pomocí vysoce purifikovaných rekombinantních a peptidových antigenů, které snižují nespecifickou reaktivitu sér na minimum.

To vše podmiňuje možnost upřednostnit použití metody IB před jinými treponemálními testy pro ověření diagnózy syfilis v obtížných případech, zejména pro diagnostiku syfilis ve druhé polovině inkubační doby, latentní vrozenou syfilis v prvních dnech život dítěte, pro detekci latentní syfilis u jedinců se slabou humorální odpovědí, stejně jako pro odlišení falešně pozitivních výsledků od jiných testů.