Definice T-lymfocytů, co to je, použití v diagnostice a léčbě

Imunofenotypizace je studie, která identifikuje a počítá krevní leukocyty, zejména lymfocyty různých skupin, v závislosti na antigenech na jejich povrchu. Lymfocyty jsou krvinky, které patří do zásoby leukocytů a charakterizují imunitní funkci lidského těla.

Lymfocyty se dělí do několika hlavních skupin: T-lymfocyty, B-buňky a NK-buňky. T-lymfocyty jsou zodpovědné za buněčnou imunitu a dále se dělí na T-pomocníky, kteří spouštějí imunitní proces a aktivují další imunitní buňky, a T-killery (cytotoxické buňky), které „zabíjejí“ postižené buňky v těle. Navíc existují T-supresory, které umožňují regulovat sílu reakce pomocníka a zabijáka. B-lymfocyty jsou buňky imunitního systému, které se podílejí na tvorbě protilátek (imunoglobulinů různých tříd) a zajišťují humorální imunitní odpověď. NK buňky (natural killer cells) jsou další třídou lymfocytů. Svými vlastnostmi se podobají T-killerům a jsou také cytotoxickými lymfocyty, které ničí infikované buňky. Jsou však ve větší míře zodpovědné za vrozenou imunitu a jsou schopny rozpoznat buňky bez hlavního histokompatibilního komplexu na jejich povrchu. Pro lidský imunitní systém je charakteristická přítomnost tzv. paměťových buněk. Jedná se o populaci, která se již v určitém okamžiku setkala s patologickými agens a je schopna rychlejší a lepší imunitní odpovědi.

Všechny lymfocyty se tvoří v červené kostní dřeni z prekurzorových buněk a liší se od sebe v závislosti na speciálních diferenciálních CD antigenech na jejich povrchu. Každá populace má svůj vlastní soubor těchto antigenů. Ke konečné diferenciaci buněk imunitního systému ak jejich „příjmu“ antigenů na jejich povrchu dochází v orgánech lymfatického systému. T buňky tedy dozrávají v brzlíku a B lymfocyty v lymfatických uzlinách a dalších periferních lymfoidních tkáních. Kromě toho jsou všechny leukocyty charakterizovány přítomností povrchového markeru CD45+. Všechny T-lymfocyty mají povrchový CD3+ antigen. T-pomocníci však mají na svém povrchu i CD4+ receptor, zatímco zabijáci se vyznačují přítomností CD8+ markeru. B buňky postrádají na svém povrchu CD3 marker a mají CD19+. NK lymfocyty mají antigeny CD56+ a CD16+. Právě díky rozdílům v povrchových markerech je možný fenotypový výzkum.

Jak se provádí imunofenotypizace buněk periferní krve?

K rozpoznání různých buněk imunitního systému se používají speciálně značené monoklonální protilátky. Studie se provádí pomocí průtokové cytometrie. Reakce je založena na interakci známých protilátek schopných fluorescence s unikátními antigeny na povrchu buněk. Naváže a vytvoří se komplex antigen-protilátka, který je osvětlen průchodem elektromagnetického záření s malým frekvenčním rozptylem (nejčastěji se používá laserový paprsek). V tomto případě se počítají buňky různých populací leukocytů.

Jaké buněčné populace jsou studovány?

Za prvé, imunofenotypové testování umožňuje posouzení velkých populací lymfocytů. Patří sem:

• všechny lymfocyty – absolutní hodnota (mají antigen CD45+);
• celkový počet všech T-lymfocytů, který je určen přítomností (+) CD3+ a nepřítomností (-) CD19- na buněčném povrchu;
• T-pomocníci (všechny typy) s antigeny CD3+ a CD4+;
• cytotoxické T-killery nesoucí CD3+ a CD8+ markery;
• B-lymfocyty s charakteristickými povrchovými markery CD19+ a nepřítomností CD3-;
• přirozené zabíječe NK s antigeny CD16+, CD56+;
• aktivní lymfocyty, které jsou určeny přítomností HLA-DR+, markeru aktivace glykoproteinu.

Kromě toho lze touto metodou určit počet monocytů v krvi, které na svém povrchu nesou specifický antigen CD14+. Posuzuje se také poměr CD4+ buněk (T-helpers) k CD8+ (T-killers).

Kdo potřebuje tento výzkum?

Je předepsána imunofenotypizační analýza krevních buněk:

1. Pro pacienty s častým nachlazením;
2. Při častých opakujících se infekcích genitourinárního systému, lézích gastrointestinálního traktu, pneumonii, exacerbacích virových onemocnění a jiných často se vyskytujících patologických procesech, jakož i při vleklých procesech s komplikacemi ve formě sepse, meningoencefalitidy a dalších závažných projevů;
3. Pokud je podezření na vrozenou nebo získanou imunodeficienci, včetně infekce HIV;
4. Pacienti s autoimunitními chorobami – roztroušená skleróza, autoimunitní tyreoiditida, Addisonova choroba atd.;
5. Při onkologických onemocněních, zejména lymfatického systému a krvetvorných orgánů;
6. Lidé s alergickými reakcemi – neurodermatitida, atopická dermatitida, alergické bronchiální astma a další onemocnění;
7. U pacientů, kteří se připravují na transplantaci orgánů a/nebo kteří ji podstoupili;
8. Při sledování odpovědi na terapii imunomodulačními léky (cytostatika, imunosupresiva);
9. V případě horečky neznámého původu po dlouhou dobu.

Co se používá k analýze a jaké jsou požadavky na odevzdání biologického materiálu?

Ke studiu imunitních buněk se používá celá žilní krev z loketní (loketní) žíly.

Pravidla pro zasílání biomateriálu:

1. 8-12 hodin před vyšetřením nejezte jídlo, vyhýbejte se tučným a smaženým jídlům; v případě potřeby je dětem a některým dospělým umožněno jíst lehká jídla dvě hodiny před testem;
2. Nejméně 24 hodin před darováním krve nekonzumujte alkoholické nápoje;
3. Nekuřte 30 minut až 2 hodiny před testem;
4. Vyhněte se fyzickému a emočnímu stresu;
5. Pokud je to možné, několik dní před darováním krve se po dohodě s lékařem vyvarujte užívání léků;

Jak interpretovat získané výsledky?

Krevní lymfocyty tvoří 20 až 38 % všech leukocytů. Jejich normální obsah v krvi dospělého člověka je asi 2,5-4,8 *109/l u dětí je tato hodnota vyšší. V tomto případě by u osob starších 15 let neměly T-lymfocyty překročit 2,2 *109/l. T-pomocníci tvoří většinu (od 35 do 55 %) lymfocytů a T-killery asi 17-35 %. B-lymfocyty jsou přítomny téměř ve stejném množství jako NK buňky a u dospělého člověka jsou přibližně 0,1-0,4 *109/l.

Každá subpopulace lymfocytů musí být v určitém objemu vzhledem k ostatním. Porušení kvantitativních ukazatelů může charakterizovat některý patologický proces.

Celkové zvýšení hladiny T buněk lze pozorovat u infekčních a zánětlivých onemocnění, především virových, u leukémie, při užívání některých léků a také fyziologicky v těhotenství u žen. Snížení může charakterizovat stavy imunodeficience, mimo jiné v důsledku příjmu chemických látek, které potlačují imunitní systém (imunosupresivní terapie). CD4+ lymfocyty se mohou zvýšit při zánětlivých procesech, přičemž nárůst v důsledku T-helperů typu 1 je pozorován u virových nebo bakteriálních infekcí, zatímco zvýšení hladiny pomocných látek typu 2 je charakteristické pro alergické zánětlivé reakce. Prudký pokles hladiny CD4+ buněk je markerem sekundární imunodeficience. U autoimunitních onemocnění je pozorován nárůst počtu T-helperů a pokles cytotoxických CD8+ buněk. Zvýšení hladiny CD8+ T-killerů je pozorováno při aktivních intracelulárních procesech virové etiologie, méně často parazitárních a bakteriálních infekcích a také u maligních novotvarů. Aktivované T-lymfocyty charakterizují závažnost procesu.

K posouzení stavu imunitního systému se navíc používá poměr CD4+ pomocníků k cytotoxickým CD8+ T buňkám. Hodnota mezi 1,1 a 2,4 je považována za normální. Pokles na 0,6 a méně je typický pro pacienty infikované HIV. K této změně dochází v důsledku prudkého poklesu hladiny T-helperů, v důsledku poškození buněk virem imunodeficience. Zvýšení poměrového indexu je typické pro autoimunitní patologie, jako je revmatoidní artritida, diabetes mellitus 1. typu atd., v důsledku zvýšení počtu CD4+ buněk.

Koncentrace B-lymfocytů produkujících imunoglobuliny různých tříd se zvyšuje při poškození tělu vlastních buněk v důsledku autoimunitních procesů, lymfomů a aktivních chronických i akutních zánětlivých procesů různé etiologie. Pokles hladin oproti normálním hodnotám lze pozorovat při redistribuci buněk z periferní krve do ložisek zánětlivých procesů a při celkovém snížení aktivity imunitního systému.

Přirození zabijáci, stejně jako ostatní buňky imunitního systému, reagují na infekční a zánětlivé procesy zvýšením jejich počtu. Jejich růst lze pozorovat i u onkologických patologií.

Jakákoli změna parametrů zjištěná při imunofenotypizaci buněk periferní krve vyžaduje konzultaci s odborným lékařem pro posouzení stavu pacienta, správnou interpretaci výsledků pro diagnostiku a léčbu.

Kde se mohu nechat otestovat a kolik to stojí?

Analýza imunofenotypizace krve může být provedena v laboratoři Dětského výzkumného centra pro licencování a klinickou imunologii. Na test se můžete přihlásit denně na telefonním čísle. Ceny za imunofenotypizaci lymfocytů periferní krve získáte na telefonním čísle nebo na webových stránkách laboratoře.